2013年高考生物：克隆技术考点汇总考点1 植物细胞工程 1．（2012广东理综．2,4分）培育草莓脱毒苗所采用的主要技术 是 ( ) A．组织培养 B．细胞杂交 C．显微注射 D．核移植 2．（2011江苏单科，14，2分）关于现代生物技术应用的叙述，错 误的是 ( ) A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C．植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育 3．（2011天津理综．8,14分）絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性 的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形 成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污 水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌 株。其流程图如下． 据图回答： (1)溶菌酶的作用是____。 (2)PEG的作用是 一。 (3)经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是____。(4)目的菌株的筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有 一的培养基上生长的AB融合菌，选择效果最好的作为目的菌株。(5)为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中；同时设置_ ___为对照组。经搅拌、静置各3分钟后，分别测定上层水样的石油浓度和COD值（COD值越高表示有机物污染程度越高），计算石油去除率和COD去除率，结果如图。5\n (6)目的菌的种群增长曲线呈 型。在40。44小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是 。4．（2010课标．40,15分）请回答： (1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的____，繁殖种苗的速度____。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 一。 (2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 一的污染。 (3)微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗____，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是 ．（脱落酸、2，4-D）。(4)将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是，单株鲜重的变化趋势是____。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量_ ___（能、不能）满足自身最佳生长的需要。(5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 一（降低，增加）培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。 植物细胞工程答案 1．A本题主要考查现代生物技术应用的相关知识。由于植物分生组 织中病毒很少或没有病毒，常用茎尖通过组织培养技术培育脱毒苗； 细胞杂交通常用于培育杂种个体；显微注射技术常用于基因工程，培 育转基因生物；核移植技术常用于培养克隆动物。故只有A选项符合 题意。2．B克隆动物是核移植工程的应用；茎尖分生能力强，没有病毒侵染， 以茎尖为外植体，通过植物组织培养可获得无病毒植株；导入目的基 因的受体细胞，需通过动物细胞培养技术获得早期胚胎，才能进一步 培育成转基因动物。3．答案(1)分解细胞壁(2)诱导原生质体融合(3)两亲本失活 部位不同，融合后活性部位互补(4)石油 (5)不加发酵液的石油 污水(6)S此期间，目的菌及其产生的絮凝活性高分子化合物的 含量高 解析(1)絮凝性细菌与石油降解菌融合时，首先需要溶菌酶分解 细胞壁获得原生质体。(2)原生质体融合时，常用PEG诱导融合。 (3)两种原生质体A、B分别经过热处理和紫外线处理失活难以生长， 但两者失活部位不同，A、B融合后活性部位互补，故仍可在再生培养 5\n基上生长。(4)我们需要的目的菌株是既能分泌具有絮凝活性的化 合物，又能在含有石油的培养基上生长。(5)设计实验探究目的菌株 不同发酵时间发酵液的絮凝效果时，实验变量是发酵液的有无，对照 组是不加发酵液的石油污水，实验组是添加发酵液的石油污水。 (6)据图知，目的菌株呈“S”型增长。40~44小时，目的菌株及其产生 的絮凝性高分子化合物的含量较高，发酵液对石油污水的净化效果 最好。4．答案(1)遗传特性快遗传信息‘(2)微生物 (3)生根细胞分裂素2，4-D (4)逐渐减小先增加后下降不能 (5)降低 解析(1)植物组织培养属于无性繁殖，后代能够保持亲本的遗传特 性。植物微型繁殖技术能够实现快速繁殖。植物组织培养的原理是植 物细胞具有全能性，即已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜 能。(2)植物组织培养接种和试管苗转接过程中都需要无菌操作，以避 免微生物（杂菌）污染。(3)微型繁殖培养基中使用的生长素与细胞分 裂素比例不同，可以分别诱导根、芽的形成。使用高浓度的植物生长素 类似物（如2，4-D）可以抑制试管苗的生长。(4)(5)分析图中曲线可 知：光合作用强度随着培养基中蔗糖浓度的增大而下降，但单株鲜重的 变化趋势是先增加后下降。培养基中不含蔗糖时，光合作用强度最大， 但由于该时期光合作用产生的有机物积累量较少，不能满足自身最佳 生长的需要。在蔗糖浓度为1%左右时，单株鲜重达到最大，此时有机 物的量能满足自身最佳生长需要。考点2动物细胞工程 1．（2011上海单科．15,2分）关于哺乳动物细胞体外培养的难 易程度，下列表述正确的是 ( ) A．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞 B．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；胚胎细胞易于脂肪细胞 C．乳腺细胞易于乳腺癌细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞 D．乳腺癌细胞易于乳腺细胞；脂肪细胞易于胚胎细胞 2．（2010广东理综．24，6分）新技术的建立和应用对生物学发 展至关重要。下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是（双 选） ( ) A．PCR技术--扩增蛋白质 B．杂交瘤技术--制备单克隆抗体 C．光学显微镜--观察叶绿体的基粒 D．花粉离体培养--培育单倍体植物 3．（2010浙江理综．4,6分）下列关于动物细胞培养的叙述，正 确的是 ( ) A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养 4．（2009山东理综，35,8分）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为 RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如图：5\n请回答：(1)过程①代表的是一 。(2)过程②构建A基因表达载体时，必须使用____和 两种工具酶。(3)过程③采用的实验技术是 一，获得的X是--O(4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行____比较；或用图中的 进行特异性结合检测。 动物细胞工程答案 1．A哺乳动物的乳腺细胞和脂肪细胞都是高度分化的细胞，体外培养 难度大，乳腺癌细胞能够恶性增殖，容易进行体外培养，胚胎细胞具有 很强的分裂增殖能力，容易进行体外培养，故A正确。2．BD本题主要考查技术（或仪器）与应用的匹配情况。A项，PCR技 术的应用是扩增基因，而不是蛋白质；B项，杂交瘤技术的应用是制备 单克隆抗体，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体；C项， 叶绿体属于显微结构，可用光学显微镜观察，叶绿体中的基粒属于亚 显微结构，则需电子显微镜才能观察；D项，培育单倍体植物主要利用 的是花粉离体培养技术。3．D由于接触抑制，动物细胞培养时只能形成单层细胞，A项错误；克 隆培养法在培养时，由于所有子代细胞来自于一个亲代细胞，所以基 因型一般都相同，B项错误；二倍体细胞的传代培养次数通常是有限 的，只有少数细胞遗传物质发生改变，才能无限增殖，C项错误；恶性 细胞系的细胞具有癌变的特点，可进行传代培养，D项正确。4．答案(1)逆（反）转录(2)限制性核酸内切酶（限制性内切酶、’限制酶）DNA连接酶（注：两空顺序可颠倒） (3)细胞融合杂交瘤细胞(4)A蛋白核酸（基因）序列抗A蛋白的单克隆抗体解析(1)以DNA为模板合成RNA的过程为转录，以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录。图中过程①5\n代表的是逆转录过程。(2)基因工程中构建基因表达载体需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端或平末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体。(3)过程③是将瘤细胞与效应B淋巴细胞融合的过程，获得的细胞是杂交瘤细胞，其具备了瘤细胞的无限增殖的特性和效应B淋巴细胞的产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体。(4)本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，通过抗A蛋白的特异性单克隆抗体能否与已知病毒进行特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在，进一步进行检测是否为目的RNA病毒。5
