阶段验收评估(八) 生物技术实践(时间：60分钟 满分：100分)一、选择题(每小题2分，共40分)1．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是( )A．分解淀粉的细菌 B．硝化细菌C．分解纤维素的细菌D．乳酸菌2．(2022·南通一调)固定化酵母在发酵生产中得到了广泛应用。下列有关叙述正确的是( )A．利用固定化酵母发酵，发酵液浓度不宜过高B．固定化酵母形成的凝胶珠越大越好，越硬越好C．固定化酵母不能繁殖，性状较为稳定D．酵母固定化的目的是提高发酵速度3．泡菜含有丰富的维生素和钙、磷等无机物，既能为人体提供充足的营养，又能预防动脉硬化等疾病。在泡菜的制作过程中，不需要控制的因素是( )A．腌制时间B．环境温度C．食盐用量D．泡菜坛容积4．某同学在制作腐乳的过程中，发现豆腐腐败变质，下列不属于其原因的是( )A．用盐腌制时，加盐量太少B．用来腌制腐乳的玻璃瓶，没有用沸水消毒C．制作卤汤时，料酒加的量较多D．装瓶后，没有将瓶口密封5．(2022·北京高考)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是( )A．让发酵装置接受光照B．给发酵装置适时排气C．向发酵装置通入空气D．将发酵装置放在45℃处6．下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )A．利用稀释涂布平板法既能分离微生物又能对微生物进行计数B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加7．向三个培养皿中分别加入1011\nmL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36h后，统计菌落数，结果如表所示。下列选项正确的是( )培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A.该实验采用的是液体培养基B．该实验采用平板划线法接种C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖8．利用PCR技术扩增目的基因的过程中，需加入( )A．耐高温的解旋酶以保证DNA双链完全解开B．2种已知核苷酸序列的引物以保证核苷酸链的延伸C．4种足量的核糖核苷酸以保证目的基因的扩增D．一定量的盐酸和氢氧化钠溶液以维持pH的稳定9．在连续发酵先后制得杨梅酒和杨梅醋的过程中，某物质的浓度变化如右图所示。该物质可能是( )A．乙酸B．酒精C．二氧化碳D．葡萄糖10．从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解。下列相关叙述错误的是( )A．不同微生物的生存环境不同，培养噬盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集B．对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养C．获得图甲、乙效果的接种方法分别是平板划线法、稀释涂布平板法D．配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整11．生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶的作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)。下列相关叙述不正确的是( )A．用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用蒸馏法从油料作物中提取B．筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源11\nC．从微生物M中分离提取的脂肪酶通常需要检测酶活性，以确定其应用价值D．若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的PCR技术12．稀释涂布平板法是微生物培养中一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是( )A．操作中需要将菌液进行一系列的梯度稀释B．需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理13．下图是水稻的花药通过无菌操作，培养产生花粉植株的两种途径的示意图。下列相关叙述正确的是( )A．图中的花粉应选自四分体时期，花药培养成功率最高B．图中的A是愈伤组织，C指诱导过程，B指生根C．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株D．要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有细胞分裂素和生长素两类植物激素14．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验原理与方法的叙述，错误的是( )A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随着溶液浓度的减小而减小B．向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水涨破，释放出其中的DNAC．向滤液中加入冷却酒精的目的是除去DNA中的杂质，纯化DNAD．向初步纯化的DNA中加入二苯胺溶液，沸水浴后可观察到溶液显蓝色15．下列关于“探究某种加酶洗衣粉使用的最适温度”的说法，最合理的是( )A．加酶洗衣粉在30℃的水中洗涤效果不如45℃时好，说明45℃为最适温度B．在不同温度的水中，加入相同的污物及不等量的洗衣粉，看哪种效果好C．取一系列不同温度、其他条件相同的水，加入等量相同的污物及等量相同的加酶洗衣粉，看哪一个温度下洗衣粉的洗涤效果最好D．将加酶洗衣粉与普通洗衣粉分别加入37℃的水中洗涤同样的污物，发现加酶洗衣粉效果好，说明加酶洗衣粉的最适温度为37℃11\n16．葡萄发酵可产生葡萄酒，甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。下列说法错误的是( )A．甲同学的错误在于未夹住发酵瓶的充气管B．丙同学的错误在于瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口C．在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，则该错误操作是未及时排气D．上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是葡萄醋、葡萄酒、葡萄醋17．人参是一种名贵的药材，其有效成分主要是人参皂苷。人参皂苷具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、抗衰老等作用。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如图所示，下列相关叙述正确的是( )A．人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用萃取法B．培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于细菌污染C．培养几天后发现少数培养基被污染，若是有光泽的黏液状菌落，属于真菌污染D．用少量胰蛋白酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量18．如图1为人工种子生产过程示意图，图2为图1中③过程的相关操作，下列相关说法正确的是( )A．图1中，过程①②分别称为再分化和脱分化B．若用图2的方法制备固定化酵母细胞，海藻酸钠溶液的浓度对实验结果影响不大C．图2中，包埋形成人工种子过程中，先适当加热使海藻酸钠溶化，再加入胚状体充分搅拌混合均匀D．制备固定化酵母细胞时，鉴定该实验的成败通常是观察凝胶珠的颜色和形状11\n19.某校学生尝试用琼脂作载体，用包埋法固定α淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。实验结果见表(加入试管中的固定化淀粉酶量与普通α淀粉酶量相同)。实验表明1号试管中淀粉未被水解，你认为最可能的原因是( )1号试管2号试管固定化淀粉酶√普通α淀粉酶√淀粉溶液√√60℃保温5分钟，取出冷却至室温，滴加碘液现象变蓝不变蓝A.实验中的温度过高，导致固定化淀粉酶失去活性B．淀粉是大分子物质，难以通过琼脂与淀粉酶接触C．水浴保温时间过短，固定化淀粉酶未将淀粉水解D．实验程序出现错误，试管中应先加入碘液后保温20．菊花的组织培养和月季的花药培养都是利用组织培养技术，关于两者的叙述下列说法中正确的有( )序号比较项目菊花的组织培养月季的花药培养①植物激素不必添加需要添加②染色体倍性的鉴定不需要需要③光照每日日光灯照射12小时最初不需要，幼小植株形成后需要④形成愈伤组织或胚状体后不需更换培养基需要更换培养基A.①②③B．②③④C．①②④D．①②③④二、非选择题(共60分)21．(12分)生物技术的广泛应用，给社会带来了较大的经济效益，受到社会广泛重视。请回答下列有关问题：(1)制作泡菜需要测定亚硝酸盐含量，其方法是________；其原理是在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生________反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成________，将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。11\n(2)1993年，美国科学家Mullis因发明了PCR技术获得了诺贝尔化学奖。PCR和生物体内DNA的复制都必需的条件包括DNA聚合酶、模板DNA、能量、游离脱氧核苷酸和________；在生物体内DNA复制所必需的，而在PCR技术中不需要的成分是________。(3)在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油中，要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用________技术实现玫瑰的快速繁殖。(4)为了节约成本可将酶或细胞固定在一定空间内。科研人员采用戊二醛使酶相互连接，该种固定方法为________；而细胞多采用________法进行固定。22．(16分)研究分解纤维素的微生物在工业生产中有积极的意义。请回答下列问题：(1)下面是分离纤维素分解菌的实验流程，请补全所缺内容：土壤取样→①________→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→②________。(2)下表为①过程中使用的培养基的配方。纤维素粉5gNaNO31gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL该培养基是液体培养基还是固体培养基？________。该培养基对纤维素分解菌怎样进行选择？_____________________________________。(3)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌________________，并最终把纤维素分解成________________。(4)在用平板计数法对分离的纤维素分解菌数目统计时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目________________(填“高”、“低”或“相同”)。(5)如图是利用__________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面。(6)欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入____________制成选择培养基进行分离；若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是________________。23.(16分)某校生物兴趣小组为探究不同浓度果胶酶对澄清苹果汁出汁率的影响，进行了如下实验。实验步骤：①制备苹果汁：将苹果洗净，切成小块，用榨汁机打碎成苹果汁匀浆。加热苹果汁到11\n100℃，再冷却至50℃左右。②配制不同浓度的酶液：取5支10mL的试管，依次编号为2～6号。分别加入不同量的质量浓度为10g/mL的果胶酶溶液，再分别加入苹果酸定容至10mL，获得质量浓度分别为2g/mL、4g/mL、6g/mL、8g/mL、10g/mL的果胶酶溶液备用。③降解苹果汁(如下图)：④沉淀：向上述6只烧杯中添加明胶、活性炭等物质搅拌处理，充分混匀后静置，分别过滤。⑤记录并处理结果：用量筒测量澄清滤液(即苹果汁)的体积，记入表格，并计算出汁率。请回答下列问题：(1)果胶酶能提高苹果的出汁率并使果汁澄清的原理是________________________________________________________________。(2)步骤①中，苹果汁先加热到100℃的目的是___________________________________________________________________________________________________________。(3)步骤②中，在2～6号试管中加入10g/mL果胶酶溶液的量分别是______________；步骤③中，在1号烧杯中加入1mL__________________________。(4)根据预期结果，请绘制出澄清苹果汁出汁率与果胶酶浓度之间大致的关系曲线，并在坐标轴上标出澄清苹果汁最高出汁率所需的果胶酶最佳浓度。24．(16分)目前大多数厂家采用低盐固态发酵工艺生产的酱油与传统酿造相比，风味较差。固定化产酯酵母可以利用酱油中的部分糖产生酒精和乙酸乙酯等呈味物质，提高了低盐固态工艺酱油的品质。下面是科研人员的实验过程和结果。实验步骤：①将冰箱中4℃保存的菌种接种在麦芽汁培养基中，30℃恒温培养3d。②称取一定量的海藻酸钠加入水中，加热溶化，配成3%的海藻酸钠溶液。③将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间后，加入产酯酵母，进行充分搅拌，混合均匀。④用10mL针筒吸取混合液滴于4%的氯化钙溶液中，形成凝胶珠。待凝胶珠在氯化钙溶液中浸泡30min后取出，用蒸馏水冲洗3次，备用。11\n⑤配制不同葡萄糖添加量的酱油，分别加入等量的固定化产酯酵母，在适宜条件下发酵一段时间后，测定酱油中酒精和乙酸乙酯的含量。实验结果：测定物质mg/100mL葡萄糖添加量/%01234酒精485129115631150836乙酸乙酯13.317.320.918.4215.9请回答下列问题：(1)步骤①的目的是______________________________________。步骤②中加热的方法是________________________________________________________________________。(2)步骤③中需将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间，其目的是________________________________________________。凝胶珠从氯化钙溶液中取出后，用蒸馏水冲洗掉凝胶珠表面的氯化钙溶液，防止________________________________________________________________________。(3)该实验结果表明________________________________________________________。(4)在传统酱油生产过程中，需向发酵液中添加一定量的食盐。若添加量过低，会________________；若添加量过高，会____________________________________________。(5)若要探究固定化产酯酵母和游离产酯酵母产生酒精和乙酸乙酯能力的差异，你的实验设计思路是__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案阶段验收评估(八)1．选C 分解纤维素的细菌将纤维素分解后，刚果红—纤维素的复合物无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。2.选A 发酵液浓度过高会导致酵母细胞失水过多而死亡。与游离的酵母相比，固定化酵母的发酵速度较慢。3．选D 在制作泡菜时，腌制时间、食盐用量和温度都需要进行控制，但泡菜坛容积不需要控制。4．选C 豆腐腐败变质是杂菌繁殖造成的。用来腌制腐乳的玻璃瓶没有用沸水消毒、装瓶后没有将瓶口密封、用盐腌制时加盐量太少或制作卤汤时加料酒量太少都会导致杂菌大量繁殖。相反，如果料酒加入过多，则不会导致杂菌大量繁殖。11\n5．选B ①酵母菌在无氧条件下才能进行发酵产生酒精。②酵母菌无氧呼吸不消耗氧气，但是产生二氧化碳。③酵母菌发酵的适宜温度在18℃～25℃。在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装置不需要接受光照，也不能通入空气，发酵过程中会产生二氧化碳，所以要适时给装置排气；发酵时一般将温度控制在18℃～25℃。6．选D 稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物进行计数；接种时要连续划线，这样可以获得单个菌落；大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，一般腌制10天后亚硝酸盐含量开始下降。7．选D 该实验的培养基中加入了琼脂，故为固体培养基；该实验要对微生物进行计数，宜采用稀释涂布平板法接种；Ⅰ与Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要生长因子；Ⅱ和Ⅲ对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖。8．选B 利用PCR技术扩增目的基因的过程中，解链是通过加热到94℃实现的，不需要加入解旋酶；原料是4种脱氧核苷酸；反应溶液体系的pH依靠磷酸缓冲液维持稳定。9．选B 在果酒发酵阶段，酵母菌无氧呼吸产生酒精，酒精浓度上升，而在果醋发酵阶段，醋酸菌利用酒精发酵产生乙酸(醋酸)，导致发酵液中酒精浓度下降。10．选C 噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生耐高温淀粉酶说明其碳源是淀粉，故对其进行培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图甲菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图乙菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法，配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行pH调整。11．选A 因为植物油不易挥发，故不能选用蒸馏法，可以用压榨法、萃取法从油料作物中提取。微生物的生长需要水、碳源、氮源和无机盐等，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源。提取的脂肪酶在应用于实验或生产之前，要先检测其活性，以确定其应用价值。在应用PCR技术扩增DNA片段时，需要具有较强耐热性的DNA聚合酶催化。12．选C 要在培养基的表面形成单个的菌落需将菌液稀释到一定程度。13．选D 在花药离体培养过程中，花粉宜选自单核期，即细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。图中的A、B、C分别为胚状体、生根和诱导。二倍体植株的花粉中只含一个染色体组，培养得到的个体为单倍体，高度不育，只有幼苗用秋水仙素处理后得到的植株才能稳定遗传。14．选A DNA在0.14mol·L－1的NaCl溶液中溶解度最小，在低于或高于这个浓度的条件下溶解度都会增大。向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水涨破，释放其中的DNA。利用DNA不溶于酒精而蛋白质等杂质溶于酒精的原理，向滤液中加入冷却酒精可进一步将DNA与蛋白质分离开，获得较纯的DNA。鉴定DNA的方法是向DNA中加入二苯胺溶液，沸水浴加热，溶液变蓝。15．选C 11\n要探究加酶洗衣粉的最佳洗涤温度，需要设置一系列温度梯度进行实验。自变量只能有温度一个，洗衣粉的用量、种类等都属于无关变量，对无关变量的控制要相同且适宜。16．选D 甲同学未夹住发酵瓶的充气管，发酵液会从充气管流出，由于氧气进入，有氧条件下醋酸菌繁殖产生葡萄醋，使发酵液变酸。丙同学的发酵瓶中发酵液过多淹没了排气管口，排气时发酵液会从排气口流出。由于发酵产生的CO2会使瓶内压强升高，所以应定期排气。由于乙、丙同学的发酵瓶中均为无氧环境，所以发酵产物均为葡萄酒。17．选A 比较培养基被污染后的菌落特征时应注意：真菌污染，为有颜色的绒毛状菌落；细菌污染，为有光泽的黏液状菌落。植物细胞之间的主要成分是果胶，利用果胶酶处理愈伤组织可以获得单个的细胞。18．选D 过程①②分别为脱分化、再分化。海藻酸钠溶液的配制是制备固定化酵母细胞的关键，如果海藻酸钠溶液的浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少，都会影响实验结果。图2中，包埋形成人工种子过程中，先适当加热使海藻酸钠溶化，然后将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入胚状体充分搅拌混合均匀。19．选B 由于固定化淀粉酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物质，它不能通过琼脂与酶充分接触，导致淀粉不能被水解。20．选D 因为菊花茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素；在菊花组织培养中不会发生染色体倍性的变化，不需要染色体倍性的鉴定；需要每天日光灯照射12小时；形成愈伤组织或胚状体后不必更换培养基。月季的花药培养需要添加细胞分裂素和生长素等植物激素；在花药培养中会出现染色体倍性的变化，所以需要染色体倍性的鉴定；最初不需要光照，幼小植株形成后需要光照；形成愈伤组织或胚状体后需要转移到分化培养基上进一步培养。21．(1)比色法 重氮化 玫瑰红色染料 (2)引物 DNA解旋酶 (3)水蒸气蒸馏法 植物组织培养(4)交联法(化学结合法) 包埋22．(1)选择培养 挑选产生透明圈的菌落 (2)液体培养基 能分解纤维素的微生物才能大量繁殖，其他微生物则难以生存 (3)纤维素酶 葡萄糖 (4)低 (5)平板划线 稀释 (6)有机磷农药 稀释涂布平板法23．(1)果胶酶能分解果胶，瓦解细胞壁 (2)使苹果中的酶失活，防止对实验结果产生干扰 (3)2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、 苹果酸(4)如下图11\n24．(1)使酵母菌活化和增殖 小火加热(或间断加热)(2)冷却至常温，防止杀死酵母菌 凝胶珠硬度过大，影响通透性(3)适当添加葡萄糖能促进酒精和乙酸乙酯的生成(或酱油中2%的葡萄糖添加量最有利于酒精和乙酸乙酯的生成)(4)造成杂菌污染 抑制酱油生产所需微生物的代谢(或影响酱油口味)(5)在酱油中分别加入数量相等的固定化产酯酵母和游离产酯酵母，其他条件保持适宜且相同。一段时间后测定酱油中酒精和乙酸乙酯的含量11
