聊城市2021~2022学年度第二学期期中教学质量检测高二生物试题一、单项选择题1.酿造陈醋主要采用糯米为主料，精选优良菌种，经过淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个主要过程酿造而成。下列有关叙述正确的是（）A.淀粉糖化的过程主要利用酵母菌细胞合成和分泌的胞外淀粉酶来完成B.醋酸发酵前进行酒精发酵是因为无氧条件下醋酸菌只能利用酒精生产醋酸C.可以通过检测醋酸发酵前后发酵液pH的变化来鉴定陈醋制作是否成功D.改变原料的种类和浓度以及菌种的种类和接种量不影响陈醋的风味和品质【答案】C【解析】【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量。（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详解】A、淀粉糖化的过程主要利用毛霉等微生物细胞合成和分泌的胞外淀粉酶来完成，A错误；B、醋酸发酵前进行酒精发酵是因为缺少糖源、氧气充足的条件下醋酸菌只能利用酒精生产醋酸，B错误；C、醋酸发酵过程中形成的醋酸使pH不断降低，因此可以通过检测醋酸发酵前后发酵液pH的变化来鉴定陈醋制作是否成功，C正确；D、改变原料的种类和浓度以及菌种的种类和接种量会影响发酵过程，从而会影响陈醋的风味和品质，D错误。故选C。2.如图表示利用白菜等蔬菜发酵制作泡菜过程中甲、乙两种生物细胞数量和pH的变化情况。\n下列有关分析正确的是（）A.甲进行需氧发酵产生的CO2是引起发酵液pH下降的主要原因B.从第10天到第22天，乙细胞数量快速增加与发酵液中的溶解氧有关C.发酵过程中，甲与乙之间的竞争强度越来越大D.与甲相比，乙对酸性和含酒精的环境具有更强的耐受性【答案】B【解析】【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、分析题图：甲表示乳酸菌，乙表示酵母菌。【详解】A、乳酸菌（甲）是厌氧菌，不进行需氧发酵，也不产生CO2，乳酸菌（甲）无氧发酵产生的乳酸是引起发酵液pH下降的主要原因，A错误；B、酵母菌（乙）在有氧条件下大量繁殖，第10天到第22天，酵母菌（乙）细胞数量快速增加，与发酵液中溶解氧有关，B正确；C、据图分析可知，发酵过程中，甲的数量先增加后趋于稳定，乙的数量先增大后减小，因此甲与乙之间的竞争强度先增大后减小，C错误；D、图中没有显示甲乙对酸性和含酒精的环境的适应情况，所以不能确定谁具有更强的耐受性，D错误。故选B。3.从传统发酵技术到发酵工程，经历了漫长的历史过程。下列关于传统发酵技术与发酵工程的比较正确的是（）A.传统发酵技术不需防止杂菌污染，发酵工程需要进行严格灭菌B.传统发酵技术不需要控制发酵条件，发酵工程需严格控制发酵条件C.传统发酵技术以固体或半固体发酵为主，发酵工程为液体发酵\nD.传统发酵技术利用天然培养基发酵，发酵工程利用合成培养基发酵【答案】C【解析】【分析】1、发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一-的产物。发酵工程在医药、食品、农业、冶金、环境保护等许多领域都得到广泛应用。2、天然培养基是指用化学成分不明确的天然物质配成，主要用于工业生产；而合成培养基是指用化学成分已知的化学物质配成，主要用于微生物的分类、鉴定。【详解】A、发酵工程需要进行严格灭菌，在利用传统发酵技术制作发酵食品的过程中，为保证产品质量，操作中也要特别注意防止杂菌污染和对发酵条件的控制，A错误；B、传统发酵技术和发酵工程为了保证产品的品质，均需严格控制发酵条件，防止杂菌污染等，B错误；C、传统发酵技术所用的是天然存在的菌种，没有进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主；发酵工程为液体发酵，C正确；D、结合分析可知，传统发酵技术是利用原料作为培养基，如制作腐乳利用豆腐作为培养基，豆腐能够提供微生物生长所需营养物质；发酵工程常用天然培养基进行生产，D错误。故选C。4.下列关于现代生物技术的叙述，正确的是（）A.利用发酵工程工厂化生产谷氨酸时，需要维持酸性环境并严格控制温度B.利用组织培养技术产生突变体，可直接培育出具有优良性状的植物新品种C.进行核移植操作时，采集到的卵母细胞需培养至MI期，进行显微操作去核D.植物体细胞杂交技术和转基因技术都能解决传统育种的远缘杂交不亲和的问题【答案】D【解析】【分析】1、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。2、植物体细胞杂交技术是指将不同种的植物体细胞，在一定的条件下融合形成杂种细胞，并\n将杂种细胞培养成新植物体的技术，实验流程是：两种植物细胞通过酶解法获得原生质体→两种植物的原生质体融合形成杂种原生质体→原生质体出现新细胞壁，形成杂种细胞→杂种细胞脱分化、再分化形成杂种植物体。【详解】A、在谷氨酸的发酵生产过程中，中性和弱碱性条件下利于谷氨酸的积累，酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，同时还需要严格控制发酵罐内温度、pH值和溶氧等发酵条件，以保证其产量，A错误；B、基因突变是不定向的，故利用组织培养技术产生突变体，还需进行筛选，才能培育出具有优良性状新品种，B错误；C、采集的卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期（或MⅡ期）才能进行显微操作去核，C错误；D、植物体细胞杂交技术和基因工程育种都可打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。故选D。5.如图表示某种哺乳动物受精作用及早期胚胎发育的部分过程。下列叙述正确的是（）A.图1中的卵子已经完成减数第二次分裂B.图2胚胎需转移至子宫内继续发育C.图3中各细胞内的DNA分子数目相同D.图4中胚胎可以用于分离胚胎干细胞【答案】D【解析】【分析】囊胚指的是内部产生囊胚液、囊胚腔的胚胎，囊胚中所有细胞都没有开始分化，这个阶段之后胚胎开始出现分化。经过卵裂，受精卵被分割成很多小细胞，这些由小细胞组成的中空球形体称为囊胚。卵裂结束，囊胚细胞要经过一系列复杂的运动，导致细胞空间相互关系的改变。【详解】A、1中精子刚进入卵细胞内，还没有刺激卵母细胞完成减数第二次分裂，A错误；B、图2为核融合，不能直接移入子宫，需进行早期胚胎培养后才能移入子宫继续发育，B错误；C、图3表示2个细胞的卵裂期细胞，在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，一个为第一极体，一个为第二极体，第二极体的细胞内的核DNA数量是其它细胞的一半，C错误；\nD、图4为囊胚，从内细胞团中可以分离胚胎干细胞，D正确。故选D。6.动物细胞培养是动物细胞工程的基本技术。下列关于动物细胞培养的说法，合理的是（）A.除细胞所需的各种营养成分外，培养基中还需添加动物血清和琼脂B.细胞培养过程中需不断通入氧气，以保证细胞的正常生命活动C.培养过程中用胰蛋白酶处理后分瓶可以有效解除细胞间的接触抑制D.传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞发生分化所致【答案】C【解析】【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详解】A、培养动物细胞要用液体培养基，不需要添加琼脂，而动物血清中含有细胞增殖必需的物质，A错误；B、细胞培养过程中需不断通入无菌95%的空气和5%的二氧化碳，以保证细胞的正常生命活动，B错误；C、培养过程中用胰蛋白酶处理后分瓶可以有效解除细胞间的接触抑制，从而保证细胞的增殖过程，C正确；D、正常细胞的细胞分裂次数是有限的，据此可知，传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞衰老或遗传物质发生改变所致，D错误。故选C。7.我国科学家利用基因编辑技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，获得5只克隆猴，用于研究节律机制。以下叙述不正确的是（ ）A.克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究\nB.可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合C.受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴D.克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性【答案】C【解析】【分析】动物体细胞核移植依据的原理还是细胞的全能性。动物细胞的全能性随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到抑制，全能性表达很难，但是动物的细胞核内仍含有该种动物的全部遗传基因，具有发育成完整个体的潜能，即动物的细胞核仍具有全能性。但只靠动物的细胞核是不行的，必需提供促进细胞核表达全能性的物质和营养条件，还要保证细胞的完整性，这样去核的卵母细胞是最合适的细胞。因为卵母细胞体积大、易操作，含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。通过核移植形成重组细胞，重组细胞必须通过细胞培养形成重组胚胎，然后才能进行胚胎移植，进入代孕母体，发育成成熟胚胎，产出即是克隆动物，该动物的核基因型与供体体细胞完全相同，该技术是一种无性繁殖技术。【详解】A、由于克隆猴基因组成差异小，用克隆猴作为实验动物，有利于使实验中的无关变量的控制，有利于增强实验的可信度，A正确；B、细胞融合的过程需要人工诱导，如聚乙二醇（PEG）、灭活的仙台病毒、电激等，可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合，B正确；C、受精卵经基因编辑后形成的胚胎发育成的个体不能叫做克隆猴，克隆猴是通过核移植技术后发育而成的，C错误；D、动物细胞核含有该物种的全套遗传信息，克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性，D正确。故选C。8.质粒是基因工程中常用的分子载体。下列有关质粒的说法正确的是（）A.质粒是独立于细菌拟核DNA之外的链状DNA分子，可在体外进行自我复制B.质粒上的基因表达不遵循中心法则，所以可用作外源DNA分子的载体C.质粒上的抗生素合成基因可作为标记基因用于重组质粒的筛选和鉴定D.作为外源DNA分子的载体，质粒需具有限制酶能够切割的位点【答案】D【解析】【分析】基因工程常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒，其中质粒是一种裸\n露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。【详解】A、质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型环状DNA分子，可在体外进行自我复制，A错误；B、质粒上的基因表达遵循中心法则，B错误；C、质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因用于重组质粒的筛选和鉴定，C错误；D、作为外源DNA分子的载体，质粒需具有多个限制酶能够切割的位点，以便能插入目的基因，D正确。故选D。9.今年3月，我国研发的重组新型冠状病毒疫苗成为国际上第一个获批临床使用的新冠病毒重组亚单位蛋白疫苗。重组亚单位蛋白疫苗是将最有效的抗原成分通过基因工程的方法，在体外细胞中表达。新冠病毒表面的S蛋白与宿主细胞表面的ACE—2结合，以启动感染。S蛋白由两个功能亚基S1和S2组成。S1包含受体结合结构域，让病毒初步附着到宿主细胞表面，而S2负责膜的融合，使得病毒进入宿主细胞。下列说法正确的是（）A.重组亚单位新冠蛋白疫苗的有效成分为S2B.制备重组亚单位新冠蛋白疫苗时，需获取大量新冠病毒S蛋白基因C.接种重组亚单位新冠蛋白疫苗后，T细胞能够迅速增殖分化并产生抗体D.与灭活病毒疫苗相比，重组亚单位新冠蛋白疫苗安全性高，但免疫作用差【答案】B【解析】【分析】疫苗通常是用灭活的或减毒的病原体制成的生物制品。接种疫苗后，人体内可产生相应的抗体，从而对特定传染病具有抵抗力。体液免疫过程为，大多数病原体经过吞噬细胞等的摄取和处理，暴露出这种病原体所特有的抗原，将抗原传递给T细胞，刺激T细胞产生淋巴因子。少数抗原直接刺激B细胞。B细胞受到刺激后，在淋巴因子的作用下，开始一系列的增殖、分化，大部分分化为浆细胞，产生抗体，小部分形成记忆细胞。抗体可以与病原体结合，从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。在多数情况下，抗原、抗体结合后会发生进一步的变化，如形成沉淀或细胞集团，进而被吞噬细胞吞噬消化。记忆细胞可以在抗原消失后很长时间内保持对这种抗原的记忆，当再接触这种抗原时，能迅速增殖分化，快速产生大量的抗体。基因工程的操作程序包括四个步骤：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。\n【详解】A、分析题意可知，S1能让病毒初步附着到宿主细胞表面，S2能使病毒的膜与人体细胞膜融合，因此阻断S1、S2的作用能抑制病毒侵入人体细胞内，故重组亚单位新冠蛋白疫苗的有效成分为S1和S2，A错误；B、由题意可知，重组亚单位蛋白疫苗是通过基因工程生产的，在制备基因表达载体时，需要大量扩增S蛋白基因，用于基因表达载体的构建，B正确；C、由分析可知，接种重组亚单位新冠蛋白疫苗后，B细胞能够迅速增殖分化形成浆细胞，浆细胞产生抗体，C错误；D、利用基因工程制备的疫苗纯度高、特异性强，比灭活病毒疫苗的效果好，免疫作用强，D错误。故选B。10.下列关于相关实验的叙述，正确的是（）A.可以用菜花、洋葱、猪血、猪肝等实验材料粗提取DNAB.针对不同的实验材料，可以选择研磨或是吸水涨破的方法破坏细胞释放其内容物C.DNA溶于酒精，某些蛋白质不溶于酒精，可利用这一原理初步分离DNA与蛋白质D.用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，凝胶的浓度不影响DNA分子的迁移速率【答案】B【解析】【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。2、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。【详解】A、猪是哺乳动物，哺乳动物成熟红细胞没有细胞核和细胞器，不含DNA，因此猪血不能用于提取DNA，A错误；B、用植物材料提取DNA时，通过研磨法破坏细胞壁及细胞膜结构；用动物细胞提取DNA时，用吸水涨破的方法破坏细胞释放其内容物，B正确；C、DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，可利用这一原理初步分离DNA与蛋白质，C错误；D、用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物时，DNA分子的迁移速率与琼脂糖的浓度、DNA分子大小等因素有关，D错误。故选B。11.下列关于生物技术的安全性及伦理问题的观点，正确的是（）\nA.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术设计婴儿性别B.若转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题C.中国政府不反对治疗性克隆，可以有限制地进行生殖性克隆研究D.基因编辑技术可改变人类进化的速度和方向，有利于人类的进化【答案】A【解析】【分析】1、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。2、设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎，然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。3、治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的，即用于产生人类个体。4、转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。【详解】A、反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术设计婴儿性别，我国不允许利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，A正确；B、转基因技术的安全问题需要验证才能得到证实，若转基因植物的外源基因来源于自然界，也有可能存在安全问题，B错误；C、中国政府的态度是禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆，C错误；D、基因编辑技术只是对个别人的个别基因进行编辑，不一定改变人类进化的速度和方向，D错误。故选A。12.下列高中生物学实验或技术操作中，能够达成目的的是（）A.消毒后植物叶片接种到无菌培养基上，培养获得抗病毒植株B.通过诱变育种定向选育出性状优良的发酵工程生产用菌种C.用T4DNA连接酶“缝合”两个双链DNA片段的黏性末端D.用同位素示踪技术筛选融合的原生质体【答案】C\n【解析】【分析】1、DNA连接酶：据酶的来源不同分为两类：E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。2、植物组织培养要求非常严格的无菌环境，如果灭菌不彻底，培养过程中存在污染，会造成培养的幼苗生长缓慢甚至培育失败。3、诱变育种的原理是基因突变。【详解】A、消毒后的植物叶片接种到无菌培养基上，经过脱分化培养可获得愈伤组织，再分化可得到完整植株，但不能获得抗病毒植株，A错误；B、诱变育种的原理是基因突变，而基因突变具有不定向性，B错误；C、T4DNA连接酶既能“缝合”两个双链DNA片段间的黏性末端，也能连接平末端，C正确；D、同位素示踪技术是从外面加入与生物体内的元素或物质完全共同运行的示踪物，用以追踪生物体内某元素或某物质的运行或变化的一种方法，不能起筛选作用，D错误。故选C。13.某课题组为得到青蒿素产量高的新品系，将青蒿素合成过程的某一关键酶基因fps在野生青蒿中过量表达，其过程如下图所示。有关叙述正确的是（）A.酶1、酶2、酶3都能连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键和氢键B.fps基因在青蒿植株中的复制和表达必须通过农杆菌的复制和表达来实现C.利用fps基因的mRNA做成分子探针可检测fps基因在青蒿细胞内是否表达D.必须检测转基因青蒿植株的青蒿素产量才能判断课题组的研究目的是否达到【答案】D【解析】【分析】基因控制蛋白质合成包括转录和翻译两个环节：1、转录是指以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对原则，合成RNA的过程。2、翻译是指以mRNA为模板，合成具有一定氨基酸排列顺序的蛋白质的过程。【详解】A、据图示可知，酶1促进逆转录的过程，故为逆转录酶，酶2、酶3用于切割目的\n基因和质粒，为限制酶和DNA连接酶，都能连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键，但不能连接氢键，A错误；B、fps基因在青蒿植株中的复制和表达，不需要该基因在农杆菌中表达，B错误；C、fps基因的mRNA做成分子探针与青蒿基因组DNA杂交，可检测fps基因在青蒿细胞内是否转录，C错误；D、判断该课题组的研究目的是否达到，必须检测转基因青蒿植株中的青蒿素产量，若产量增高，则说明达到了目的，D正确。故选D。14.科学家以质粒为载体，将甜菜碱等有机小分子的合成基因导入烟草细胞中，培育出了高抗旱性转基因烟草。下列叙述错误的是（）A.高抗旱性转基因烟草的培育过程是通过基因重组产生新性状的过程B.转基因烟草细胞的细胞液渗透压升高，可避免细胞过度失水C.将甜菜碱合成基因等插入启动子和终止子之间以便大量复制D.在干旱条件下可以筛选出成功导入重组质粒的烟草植株【答案】C【解析】【分析】基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术，是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。【详解】A、将甜菜碱等有机小分子的合成基因导入烟草细胞中，培育出了高抗旱性转基因烟草，原理是基因重组，A正确；B、将甜菜碱、海藻糖等有机小分子的合成基因转入烟草细胞中后,烟草细胞中甜菜碱等有机小分子的合成量增加，会使烟草细胞液的渗透压升高,避免细胞过度失水,因此会使烟草的抗旱性增强，B正确；C、将甜菜碱合成基因等插入启动子和终止子之间以便其表达，C错误；D、在干旱条件下可以筛选出成功导入重组质粒的烟草植株，淘汰不耐干旱的植株，D正确。\n故选C。15.双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）与脱氧核苷三磷酸（dNTP）的结构如图所示。已知ddNTP按碱基互补配对的方式加到正在复制的DNA子链中后，子链的延伸立即终止。现通过PCR技术获得被标记且以碱基“T”为末端的、不同长度的DNA子链片段。在反应管中已经有单链模板、引物、相关的酶和相应的缓冲液等，还需加入的原料是（）①dCTP，dGTP，dATP②dGTP，dATP，dTTP，dCTP③α位被32P标记的ddTTP④γ位被32P标记的ddTTPA.①③B.①④C.②③D.②④【答案】C【解析】【分析】1、DNA分子复制的场所、过程和时间：（1）DNA分子复制的场所：细胞核、线粒体和叶绿体。（2）DNA分子复制的过程：①解旋：在解旋酶的作用下，把两条螺旋的双链解开。②合成子链：以解开的每一条母链为模板，以游离的四种脱氧核苷酸为原料，遵循碱基互补配对原则，在有关酶的作用下，各自合成与母链互补的子链。③形成子代DNA：每条子链与其对应的母链盘旋成双螺旋结构。从而形成2个与亲代DNA完全相同的子代DNA分子。（3）DNA分子复制的时间：有丝分裂的间期和减数第一次分裂前的间期。2、PCR条件包括：模板、引物、耐高温DNA聚合酶、四种脱氧核苷三磷酸（dNTP），还需要一定的离子浓度等。【详解】由题意可知，该同学的目的是为得到放射性标记T为末端的、不同长度的子链DNA片段。则必须提供四种dNTP，如果没有dTTP则所有片段长度均一致，因为所有子链在合成时均在第一个T处掺入双脱氧的T而停止复制，故选②。由图可知，ddTTP要作为DNA复制的原料则需要脱去两个磷酸基团，故应将放射性32P标记于α位，故选③。C正确。故选C。\n二、不定项选择题16.获得微生物纯培养物常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法。下列选项中，属于对二者共同点的描述的是（）A.利用无菌水梯度稀释分散菌种，以达到分离纯化菌种的目的B.在酒精灯火焰处进行接种，培养时一般需要将平板倒置C.设置不接种的空白平板同时培养，以检验培养基是否有杂菌污染D.能够培养得到单菌落，选取菌落数目稳定时的记录作为结果进行计数【答案】BC【解析】【分析】微生物常见的接种方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、利用无菌水梯度稀释分散菌种，以达到分离纯化菌种的目的是稀释涂布平板法的操作，平板划线法不用无菌水稀释，A错误；B、为防止杂菌污染，接种操作时都需要在酒精灯火焰处进行；为了便于观察和防止培养基中水分过快蒸发和冷凝形成的水滴倒流，培养时一般需要将平板倒置，B正确；C、设置不接种的空白平板同时培养，以检验培养基是否有杂菌污染，确保实验结果的准确性，C正确；D、两种接种方法操作得当都能够培养得到单菌落，但能用于菌落计数的接种方法是稀释涂布平板法，平板划线法不能用于计数，D错误。故选BC。17.我国科学家成功建立了源自小鼠的孤雄单倍体胚胎干细胞（拥有类似于正常胚胎干细胞特性的细胞类群）。他们将Oct4—EGFP转基因小鼠的单倍体精子的头部转移到移除了细胞核的卵母细胞中，通过Hoechst染色可以发现精子的头部发生了解聚化，约有21％的细胞形成了囊胚期细胞。下列相关说法正确的是（）A.实验中用到了动物细胞核移植技术B.Hoechst染色可能是一种染色体染色法C.孤雄单倍体胚胎干细胞有自我更新的能力，没有分化的潜能D.孤雄单倍体胚胎干细胞中只有一个染色体组，利于研究一些未知的隐性表型基因\n【答案】ABD【解析】【分析】胚胎干细胞（简称ES、EK或ESC细胞）是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。【详解】A、将Oct4―EGFP转基因小鼠的单倍体精子的头部转移到移除了细胞核的卵母细胞中，为核移植技术，A正确；B、通过Hoechst染色可以发现精子的头部发生了解聚化，Hoechst染色可能是一种染色体染色法，B正确；C、分裂是分化的基础，孤雄单倍体胚胎干细胞有自我更新的能力，也有分化的潜能，C错误；D、孤雄单倍体是单倍体精子发育而来，其胚胎干细胞中只有一个染色体组，利于研究一些未知的隐性表型基因，D正确。故选ABD。18.N基因编码的M蛋白在动物X的肝细胞中特异性表达。研究人员将外源DNA片段F插入N基因的特定位置，再通过核移植等技术获得N基因失活的转基因克隆动物X。下列说法正确的是（）A.DNA片段F插入N基因时，限制酶与DNA连接酶识别序列与作用位点相同B.进行核移植操作时，需选用动物X的去核肝细胞作为受体细胞C.转基因克隆动物X的获得过程还用到动物细胞培养、胚胎移植等技术D.转基因克隆动物X的N基因失活是因为基因N与F发生了定向基因重组【答案】C【解析】【分析】1、核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物，克隆动物的核基因完全来自供体动物，而细胞质基因来自受体细胞。核移植包括体细胞核移植和胚胎细胞核移植，其中体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，因为体细胞的全能性低于胚胎细胞。2、基因工程的工具有限制酶、DNA连接酶、载体。限制酶能识别特定的核苷酸序列，DNA连接酶不能。【详解】A、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA\n分子，是特异性地切断DNA链中磷酸二酯键的酶；而DNA连接酶连接的是磷酸二酯键，但不具备识别序列的作用，A错误；B、进行核移植操作时，需选用动物X的去核卵母细胞作为受体细胞，B错误；C、转基因克隆动物X的获得过程还需用到动物细胞培养（转基因受精卵的培养）、胚胎移植（将早期胚胎移入受体内发育形成个体）等技术，C正确；D、转基因克隆动物X的N基因失活的原因是外源DNA片段F插入N基因的特定位置，使其不能表达，该过程属于基因突变，不属于基因重组，D错误。故选C。19.两种远缘植物体细胞融合会导致一方的染色体被排出。若一方细胞的染色体在融合前断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可整合到另一方细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。现利用抗黑胫病的黑芥与不抗黑胫病的甘型油菜获得了抗黑胫病的甘型油菜新品种，过程如下图所示。下列说法正确的是（）A.②过程紫外线照射剂量不同会导致黑芥染色体断裂程度不同B.抗黑胫病的甘型油菜染色体上整合了黑芥的染色体片段C.对杂种植株进行黑胫病菌的接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株D.分析杂种植株染色体变异类型，需以双亲植株的染色体形态和数目作为参照【答案】ABCD【解析】【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。植物体细胞杂交过程中的一个关键环节，是原生质体间的融合，必须要借助一定的技术手段才能实现。分析题图可知，①为去除细胞壁的过程，②是利用紫外线照射使黑芥原生质体中的染色体断裂，③为原生质体的融合过程，④是通过植物组织培养获得杂种植株。\n【详解】A、②表示用紫外线照射使黑芥的染色体断裂，使用剂量不同可能会导致黑芥染色体断裂程度不同，A正确；B、分析题意可知，“若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中”，而且图示操作过程获得了抗黑胫病的甘型油菜，可推测抗黑胫病的甘型油菜染色体上整合了黑芥的染色体片段，因此获得了抗黑胫病的性状，B正确；C、由题图可知，对杂种植株进行黑胫病菌的接种实验，能够淘汰掉不具有抗性的个体，筛选出抗黑胫病菌的杂种植株，C正确；D、该操作过程是利用植物体细胞杂交培育的新品种，培育过程中会出现染色体片段与染色体的整合，因此分析杂种植株染色体变异类型时，需以双亲植株的染色体形态和数目作为参照，D正确。故选ABCD。20.人体内的t—PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓，但给心梗患者注射大剂量基因工程t—PA会诱发颅内出血。研究证实，将t—PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低其出血副作用。对天然t—PA基因进行改造，并使其在大肠杆菌细胞内表达，可制造出改良t—PA蛋白。如图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒，新霉素为抗生素。有关叙述正确的是（）A.制造出性能优异的改良t—PA蛋白的过程属于蛋白质工程B.用XmaⅠ和BglⅡ切开pCLY11，才能使其与t—PA改良基因高效连接C.选择有新霉素抗性的大肠杆菌作为受体细胞进行重组质粒的筛选和鉴定D.区分重组质粒和原有质粒的一个标志是可以观察mlacZ基因的表达情况\n【答案】ABD【解析】【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或者制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活需求。【详解】A、根据题干“对天然t—PA基因进行改造，并使其在大肠杆菌细胞内表达，可制造出改良t—PA蛋白”可知，制造出性能优异的改良t—PA蛋白的过程属于蛋白质工程，A正确；B、目的基因的黏性末端图中已经给出，观察各限制酶的识别序列可知所使用的限制酶为XmaI和BglⅡ，要想把目的基因与载体pCLY11拼接起来需要得到相同的黏性末端，因此运载体pCLY11也需要XmaⅠ和BglⅡ切割，B正确；C、由于标记基因存在于原有质粒上，若未连接目的基因的质粒导入到大肠杆菌中，这些大肠杆菌也可以获得新霉素的抗性，因此选择有新霉素抗性的大肠杆菌作为受体细胞不能进行重组质粒的筛选和鉴定，C错误；D、区分重组质粒和原有质粒的一个标志可以观察mlacZ基因的表达情况，由于重组质粒拼接了目的基因，破坏了mlacZ基因，因此在重组质粒中该基因不表达，菌落呈现白色，而原有基因由于该基因保存完整，可以表达，所以菌落呈现蓝色，D正确。故选ABD。三、非选择题21.研究人员从受污染河水中筛选分离得到一株以SDBS（不含氮元素）作为唯一碳源和能源生长的菌株WZR—A。分离得到WZR—A后，将其置于最适培养温度30℃、摇床转速200r/min条件下培养，测定其生长曲线如图所示。（注：OD600为样品中蛋白质、核酸的浓度，用此指标来代表细菌浓度）。请分析回答：（1）从受污染河水中筛选分离能降解SDBS的微生物时，需配制固体选择培养基。选择培养基指____________。在该选择培养基上，只有____________\n才能生长繁殖形成菌落，可根据菌落____________（答出三项）等特征，初步鉴定微生物种类。（2）从物理性质来看，培养WZR—A时所用培养基为____________；若培养时将摇床转速由200r/min增加到250r/min，则达到生长曲线中m点对应的WZR—A浓度时所需时间____________（填“大于”、“等于”或“小于”）10h，原因是____________。（3）通常，在培养末期细菌的数量会显著减少，但WZR—A的生长曲线表明，研究人员实际测得的WZR—A浓度下降较慢，最可能的原因是____________。【答案】（1）①.允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基②.能降解利用SDBS的微生物③.形状、大小、颜色、透明度等（2）①.液体培养基②.小于③.摇床转速增加，增加了培养液中溶解氧的量（3）死亡菌体蛋白质、核酸没有分解（或测得的是蛋白质、核酸浓度而不是细胞浓度；或死亡菌体没有自溶，不能与活菌区分）【解析】【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。2、选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能。【小问1详解】选择培养基能根据微生物的特点将目的菌筛选出来，是指允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。在特定选择培养基上，只有目的菌才能生长繁殖形成菌落，因此再以以SDBS（不含氮元素）作为唯一碳源和能源的选择培养基上，只有能降解利用SDBS的微生物才能生长形成菌落。不同的微生物形成不同的菌落，因此可根据菌落形状、大小、颜色、透明度等等特征初步鉴定微生物种类。【小问2详解】分析题图，在不同时间测定培养液中细菌浓度，由此可见该选择培养基为液体培养基。图中m点为增长速率最大的点，增加摇床转速，可增加培养液中的溶解氧，可促进细菌的繁殖，则达到生长曲线中m点对应的WZR—A浓度时所需时间小于10h。小问3详解】图中曲线测定的值是在波长为600nm\n下样品中蛋白质、核酸的光吸收值，反应的是蛋白质、核酸的浓度，而不能完全等同于细菌的浓度。在培养末期细菌因营养物质不足、生存空间有限导致种内斗争加剧而引起细菌数量显著减少，但死亡菌体的蛋白质、核酸没有分解，因而影响实验结果。【点睛】本题主要细菌分离培养的相关知识，解题关键是掌握选择培养基的定义和使用，能准确分析题目信息并进行作答是解答本题的关键。22.束顶病毒是香蕉的严重病害之一，生产上常用感病植株的茎尖作外植体以获得脱毒苗。“茎尖脱毒”是迄今为止清除植物体内病毒最有效的生物技术，但其深层机理一直未被揭示。我国科学家研究发现植物茎尖无法被病毒侵染，是因为存在于茎尖的植物干细胞内免疫病毒关键因子———WUS蛋白的作用，其作用机制如图所示。请分析回答：（1）“茎尖脱毒”技术属于植物细胞工程中____________技术在生产实践上的应用。（2）培养前，需对茎尖进行____________处理。写出培育香蕉脱毒苗的基本步骤____________（用文字和箭头表示）。（3）为提高香蕉脱毒苗培育的成功率，科研人员进行了相关实验，结果如表所示。该实验对香蕉脱毒苗培育的启示____________。茎尖预处理成活茎尖数成活率（%）脱毒茎尖数脱毒率（%）未低温保存3093.75826.67超低温保存3355.002060.61\n（4）干细胞的特点是____________。是当植物受到病毒侵染时，植物干细胞内的WUS蛋白表达量会____________。WUS蛋白的作用机制显示，它可以____________，从而减少病毒的增殖和传播。【答案】（1）植物组织培养（2）①.消毒②.茎尖组织愈伤组织芽、根等→试管苗脱毒苗（3）培育香蕉脱毒苗时，可以先将离体的茎尖进行超低温保存，然后再进行组织培养（4）①.具有分裂能力和分化潜能（或具有自我更新能力及分化潜能）②.增加③.抑制病毒蛋白质的合成（或病毒的mRNA与宿主细胞的核糖体的结合）【解析】【分析】植物组织培养条件：（1）在无菌条件下进行人工操作。（2）保证水、无机盐、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有机物）、生长因子（维生素）等营养物质的供应。（3）需要添加一些植物生长调节物质，主要是生长素和细胞分裂素。（4）愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体，能进行光合作用，故需光照。【小问1详解】“茎尖脱毒”技术属于植物组织培养技术在生产实践上的应用。【小问2详解】获得脱毒苗需对培养的茎尖进行消毒处理。培育香蕉脱毒苗的基本步骤：取茎尖组织经脱分化培养获得愈伤组织，接种在再分化培养基上，经分化长出芽、根等，获得试管苗，再经筛选、鉴定，练苗后获得脱毒苗。【小问3详解】分析表格可知，对茎尖超低温保存，可提高脱毒率，因此为获得较好的脱毒效果，培育香蕉脱毒苗时，可以先将离体的茎尖进行超低温保存，然后再进行组织培养。【小问4详解】干细胞具有分裂能力和分化潜能。根据图示可知，当植物受到病毒侵染时，植物干细胞内的WUS蛋白表达量会增加。WUS因子可以抑制病毒蛋白质的合成，从而导致病毒颗粒不能组装。\n【点睛】本题结合图解考查植物组织培养，要求考生识记植物组织培养的原理和培养条件等知识，能从题图中获取有效信息结合所学知识准确作答。23.β-淀粉样蛋白（Aβ）在脑组织内堆积会导致阿尔茨海默病。小胶质细胞是脑组织中的重要免疫细胞，具有清除Aβ的功能。CD22是一种仅表达在小胶质细胞表面的膜蛋白。研究人员利用生物技术制备抗CD22单克隆抗体（单抗），并对抗CD22单抗对小胶质细胞清除能力的影响进行评估。请回答：（1）制备抗CD22单抗时，需用CD22间隔多次免疫小鼠，目的是____________。几周后取免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入____________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出抗原—抗体反应最____________（填“强”或“弱”）的培养孔所对应的小鼠N。（2）取小鼠N的____________细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有____________能力的细胞。在多孔培养板上培养这些细胞，吸取有克隆生长的细胞培养孔中的____________（填“上清液”或“沉淀细胞”），应用相关技术进行抗体检测，从中选择____________的杂交瘤细胞，进行体外培养，获得实验用抗体。（3）研究人员给实验组小鼠的大脑注射抗CD22单抗，对照组不注射，评估抗CD22单抗对小胶质细胞清除能力的影响。48小时后，得到如图所示结果。请解释实验组小鼠脑中Aβ含量低的原因____________。据此分析，若敲除CD22蛋白基因，小鼠脑中的Aβ含量会____________。【答案】（1）①.刺激小鼠产生更多能合成分泌抗CD22抗体的B淋巴细胞②.CD22③.强（2）①.脾脏②.无限增殖③.上清液④.大量产生抗CD22单抗（3）①.抗CD22单抗与小胶质细胞膜上的CD22特异性结合，使细胞膜上的CD22蛋白减少，从而解除对小胶质细胞清除的抑制②.减少\n【解析】【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。【小问1详解】制备抗CD22单抗时，需用CD22间隔多次免疫小鼠，目的是通过二次免疫增强小鼠免疫反应，刺激小鼠产生更多能合成分泌抗CD22抗体的B淋巴细胞。几周后取免疫小鼠的血清，通过抗原抗体分子杂交进行抗体检测：分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入CD22蛋白（抗原）以检测这些小鼠产生的抗体。然后依据反应结果，选出抗原-抗体反应最强的培养孔所对应的小鼠N，其针对CD22的免疫反应最强。【小问2详解】根据单克隆抗体的制备过程可知，取小鼠N的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有无限增殖能力的杂交瘤细胞，这是第一次筛选。在多孔培养板上培养这些细胞，吸取有克隆生长的细胞培养孔中的上清液（含有抗体），应用抗原-抗体分子杂交技术进行抗体检测，从中选择能大量产生抗CD22单抗的杂交瘤细胞，进行体外培养，获得实验用抗体。【小问3详解】根据题图可知，与对照组相比实验组中Aβ含量降低，故此可推测，小胶质细胞表面的CD22膜蛋白的存在不利于小胶质细胞对β-淀粉样蛋白（Aβ）的清除，实验组小鼠的大脑注射抗CD22单克隆抗体，抗CD22单抗与小胶质细胞膜上的CD22特异性结合，使细胞膜上的CD22蛋白减少，从而解除对小胶质细胞清除的抑制，使Aβ含量减少。若敲除CD22蛋白基因，则CD22蛋白不能合成，结合CD22膜蛋白的存在不利于小胶质细胞对β-淀粉样蛋白（Aβ）的清除，可知小鼠脑中的Aβ含量会减少。【点睛】本题考查细胞工程技术在单克隆抗体制备中的应用，要求掌握单克隆抗体制备过程，明确每一步操作的目的，再结合题中实验结果分析进行作答，难度适中。24.精子载体法是制备转基因动物的方法之一。该方法以精子作为外源基因载体，使精子携带外源基因进入卵细胞。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。请分析回答：\n（1）②过程利用了____________技术，操作前需要对卵母细胞进行成熟培养，原因是____________。（2）③过程中细胞增殖方式为____________。经③过程后，胚胎发育至____________阶段时，可进行④过程。（3）④过程前，需要对代孕母鼠进行____________处理，以为植入胚胎提供适合的生理环境。代孕母鼠对植入胚胎不发生免疫排斥，这为____________提供了生理基础。（4）据图分析，将外源基因与小鼠精子共同培养，可以使精子获得外源基因，这说明____________。外源基因能够整合到精子的____________是提高转化率的关键，理由是____________。【答案】（1）①.体外受精②.卵母细胞发育成熟至MⅡ期才具备与精子受精的能力（2）①.有丝分裂②.桑葚胚或囊胚（3）①.发情②.植入胚胎的存活（4）①.小鼠精子有自发结合外源DNA的能力②.染色体上③.受精时只有精子的头部（细胞核）才能进入卵细胞中【解析】【分析】分析题图：图示首先通过转基因技术将目的基因导入到成熟精子中并整合到染色体上，再通过体外受精作用将目的基因移入到受精卵中，再通过早期胚胎培养和胚胎移植，最终获得转基因鼠。因此①是转化目的基因进入精子中并整合到染色体上，②是体外受精，③是早期胚胎培养，④是胚胎移植。【小问1详解】②表示体外受精过程，因此需要采用体外受精技术，由于卵母细胞需要发育成熟至MⅡ期才具备与精子受精的能力，因此操作前需要对卵母细胞进行成熟培养。【小问2详解】③过程是早期胚胎培养，细胞增殖方式为有丝分裂；经③过程后，胚胎发育至桑葚胚或囊胚阶段时，可进行④胚胎移植过程。\n【小问3详解】④过程前，需要对代孕母鼠进行同期发情处理，使其生理状态与供体相同，以保证移入的胚胎在相同的生理条件下发育；代孕母鼠对植入胚胎不发生免疫排斥，这为植入胚胎的存活提供了生理基础。【小问4详解】据图分析，将外源基因与小鼠精子共同培养，可以使精子获得外源基因，这说明小鼠精子有自发结合外源DNA的能力，能使外源基因进入精子。由于受精时只有精子的头部（细胞核）才能进入卵细胞中，因此外源基因能够整合到精子的染色体上才能保证外源基因进入受精卵，形成转基因鼠，所以外源基因能够整合到精子的染色体上是提高转化率的关键。【点睛】本题结合图解，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的细节问题；识记动物细胞培养的过程、条件等知识，能结合所学的知识准确答题。25.噬菌体展示技术是将外源目标基因插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使目标蛋白被展示到噬菌体表面的生物技术（下图所示）。被展示的蛋白质可以保持相对独立的空间结构和生物活性，以利于靶分子的识别和结合。请分析回答：（1）插入载体之前，目标基因一般需经PCR扩增。PCR扩增基因的原理是____________。若目标基因的核苷酸序列未知，但已知其临近区域的上、下游的部分序列如下所示，请从表中所列引物中选出一对合适的引物用于目标基因的PCR扩增：____________。5′—GACGCATTACGGTAAC••••••TCCAGCTTAGCAGTAA—3′3′—CTGCGTAATGCCATTG••••••AGGTCGAATCGTCATT—5′引物Ⅰ引物Ⅱ甲5′—CTGCGTAATGCCATTGA5′—AGGTCGAATCGTCATT\n乙5′—GACGCATTACGGTAACB5′—TCCAGCTTAGCAGTAA丙5′—GTTACCGTAATGCGTCC5′—TTACTGCTAAGCTGGA丁5′—CAATGGCATTACGCAGD5′—AATGACGATTCGACCT（2）目标基因能够与噬菌体外壳蛋白结构基因拼接成功，其结构基础是____________；建立噬菌体展示库需用的工具酶有____________。（3）目标蛋白的筛选利用了____________方法，其原理是____________。（4）扩大培养时，进行诱变处理的目的可能是通过提高某些基因的突变率而获取____________；根据噬菌体的特征，扩大培养体系中必须含有____________，噬菌体才能繁殖。多次筛选后，____________的噬菌体得到高度富集。【答案】（1）①.DNA的半保留复制②.乙和C（2）①.它们的基本组成单位都是脱氧核苷酸，且都具有双链（双螺旋）结构②.限制酶和DNA连接酶（3）①.抗原—抗体杂交法②.抗原抗体的结合具有特异性（4）①.具有更强生产目标蛋白能力的噬菌体、与靶分子更具亲和力的目标蛋白等②.活细菌③.能与靶分子特异结合【解析】【分析】1、PCR技术：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3′端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5′端自3′端延伸的。PCR实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。2、病毒是非细胞生物，只能寄生在活细胞中进行生命活动。【小问1详解】PCR扩增基因的原理为：DNA的半保留复制。因为子链延伸需从引物3′端开始，所以引物5′\n端应3′端互补配对，故选乙和C。【小问2详解】目标基因能够与噬菌体外壳蛋白结构基因拼接成功，其结构基础是它们的基本组成单位都是脱氧核苷酸，且都具有双链(双螺旋)结构。建立噬菌体展示库需用的工具酶有限制酶（切割基因）和DNA连接酶（连接基因）。【小问3详解】利用抗原一抗体杂交法，可以筛选出目标蛋白，其原理是抗原抗体的结合具有特异性。【小问4详解】扩大培养时，进行诱变处理的目的可能是通过提高某些基因的突变率而获取具有更强生产目标蛋白能力的噬菌体。噬菌体是病毒，必须寄生在活细胞内，因此扩大培养体系中必须含有活细菌。结合题干“被展示的蛋白质可以保持相对独立的空间结构和生物活性，以利于靶分子的识别和结合”可知，多次筛选后，能与靶分子特异结合的噬菌体得到高度富集。
