此卷只装订不密封班级姓名准考证号考场号座位号此卷只装订不密封班级姓名准考证号考场号座位号2022届高三二轮综合卷生物（五）注意事项：1．答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2．选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3．非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。第Ⅰ卷（选择题）一、选择题：本题共6小题，每小题6分，共36分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1．细胞作为生命系统中最基本的层次，可以完成多项生命活动，这与其精妙的内部结构息息相关。下列有关细胞结构和功能的叙述，正确的是（ ）A．蛋白质是生命活动的主要承担者，都是由内质网上的核糖体合成的B．信息从一个细胞传递给另一个细胞时，都需要信号分子和受体的参与C．水绵与黑藻都是自养生物，其光合色素都分布在叶绿体的类囊体薄膜上D．细胞内的蛋白质、核酸、多糖等生物大分子都通过囊泡进行运输【答案】C【解析】A．蛋白质是生命活动的主要承担者，分泌蛋白由内质网上的核糖体合成的，胞内蛋白由游离的核糖体合成，A错误；B．信息从一个细胞传递给另一个细胞时，都需要信号分子，但不一定需要细胞膜上的受体，比如高等植物细胞之间通过胞间连丝进行信息传递，B错误；C．水绵与黑藻都能进行光合作用产生有机物，都属于自养生物，且两者都是真核生物，具有叶绿体，其光合色素都分布在叶绿体的类囊体薄膜上，C正确；D．细胞内的蛋白质、核酸、多糖等生物大分子不都通过囊泡进行运输，比如DNA聚合酶的本质是蛋白质，在核糖体合成后通过核孔进入细胞核，细胞核内的RNA直接从核孔出来也不通过囊泡运输，D错误。故选C。2．溶酶体内含有多种水解酶，其膜上的V-ATPase是一种ATP水解酶。它在水解ATP的同时，能将H+泵入溶酶体内。下列叙述错误的是（ ）A．溶酶体内多种水解酶的最适pH小于7B．抑制V-ATPase活性将导致溶酶体活性增强C．V-ATPase也是一种参与主动运输的蛋白质D．溶酶体降解大分子后所得产物可被细胞再利用【答案】B【解析】A．根据分析可知，溶酶体内显酸性，溶酶体内的pH小于7，含有多种水解酶，因此，溶酶体内多种水解酶的最适pH小于7，A正确；B．抑制V-ATPase活性，将会导致氢离子进入溶酶体受阻，溶酶体内的pH发生改变，导致溶酶体活性受抑制，B错误；C．根据分析可知，V-ATPase实际是一种参与主动运输的蛋白质，相当于转运氢离子的蛋白质，C正确；D．溶酶体降解大分子后所得产物有的可被细胞再利用，有的作为代谢废物可以被细胞排出细胞外，D正确。故选B。3．某同学模拟赫尔希和蔡斯做了T2噬菌体侵染大肠杆菌的部分实验，将a、b噬菌体（它们已被32P或35S中的其中一种标记）分别侵染甲、乙两管中未标记的大肠杆菌，经保温、搅拌和离心后，检测离心管内放射性物质的位置，结果：甲管上清液有放射性，沉淀物无放射性；乙管上清液无放射性，沉淀物有放射性。下列叙述正确的是（ ）A．检测结果表明噬菌体的DNA和蛋白质均可侵入大肠杆菌内B．实验结果表明a的蛋白质外壳和b的DNA均具有放射性C．伴随着噬菌体DNA的复制，乙管内沉淀物的放射性将逐渐增强D．可以确定甲管的放射性来自32P，乙管的放射性来自35S【答案】B【解析】A．检测结果表明只有噬菌体的DNA可侵入大肠杆菌内，蛋白质没有侵入大肠杆菌内，A错误；B．由于32P标记的是DNA，而35S标记的是蛋白质外壳，实验结果为甲管上清液有放射性，沉淀物无放射性，乙管上清液无放射性，沉淀物有放射性，表明a噬菌体的蛋白质外壳和b噬菌体的DNA均有放射性，B正确；C．DNA分子的复制方式为半保留复制，由于原料来自细菌，伴随着噬菌体DNA的复制，乙管内始终只有2个DNA含有标记，故沉淀物的放射性不变，C错误；D．甲管的放射性来自35S，乙管的放射性来自32P，D错误。故选B。4．科研人员培育了一种GS神经细胞能表达铁蛋白的转基因小鼠，电磁波可激活铁蛋白引发该神经元兴奋，如图甲所示。用电磁波照射转基因小鼠和非转基因小鼠，检测其血糖浓度变化，结果如图乙所示。下列叙述错误的是（ ）5
A．铁蛋白的出现说明无机盐可以参与细胞中化合物的合成B．给予GS神经细胞电磁波刺激，铁蛋白能引起Na+大量内流C．GS神经细胞兴奋后，胰岛A细胞的分泌活动增强从而升高血糖D．电磁波照射停止后，转基因小鼠的胰岛素浓度能较快地恢复正常【答案】D【解析】A．电磁波激活铁蛋白促进了阳离子（钠离子）内流，产生了兴奋，进而引起了血糖含量上升，而促进血糖含量上升的激素主要是胰高血糖素，据此可推测，电磁波阳离子内流产生兴奋引起的神经调节促进了胰高血糖素的合成，进而使血糖水平上升，因此该实验可说明无机盐可以参与细胞中化合物的合成，A正确；B．神经元兴奋状态时，细胞膜电位为外负内正（原因：Na+内流），据此可推测，给予GS神经细胞电磁波刺激，铁蛋白能引起Na+大量内流，B正确；C．电磁波引起GS神经元兴奋后，通过调节细胞内新陈代谢，最终升高血浆葡萄糖水平，据此可推测，GS神经细胞兴奋后，胰岛A细胞的分泌活动增强从而升高血糖，C正确；D．因为体内降血糖的激素是胰岛素，胰岛素分泌后通过促进组织细胞摄取、利用和储存葡萄糖实现血糖水平的降低，而激素调节具有作用时间长，效果缓慢的特点，故电磁波照射停止后，转基因小鼠的胰岛素浓度也不能较快地恢复正常，D错误。故选D。5．大豆的根常形成根瘤。根瘤中的根瘤菌能将空气中的氮转变成氨供大豆利用，并从大豆的根中获取有机物，根瘤破溃能增加土壤的氮素营养。在种植大豆的田里，间种少量的玉米可增产增收。下列相关分析正确的是（ ）A．大豆田里不需要施氮肥B．间种加强了大豆根瘤菌的互利共生关系C．玉米、大豆的种植密度应保持相同D．宜选择对无机盐需求相似的作物间种【答案】A【解析】A．与大豆共生的根瘤菌可以将空气中的氮转变成氨供大豆利用，根瘤破溃能增加土壤的氮素营养，故种植大豆的田里不需要另外施加氮肥，A正确；B．大豆地里间种玉米，两者的根系在土壤中竞争水肥，根瘤菌与大豆之间的互利共生关系没有因间种而加强，B错误；C．设计玉米、大豆的种植密度不仅要考虑两种作物合适的种群密度，降低种内斗争程度，还应考虑玉米与大豆之间合理的镶嵌分布，故两种作物的种植密度不能相同，C错误；D．选择对无机盐需求相似的物种间种，会加强农作物的种间竞争关系，不利于增产，故宜选择对无机盐需求不相似的作物间种，D错误。故选A。6．鸡的性别是由性染色体ZW决定的，某实验小组欲探究鸡的长腿（A）和短腿（a）基因的位置，下列相关实验的叙述错误的是（ ）A．选短腿雄性和长腿雌性亲本杂交，根据子代表现型可判定基因A/a位于常染色体还是仅位于Z染色体上B．选短腿雄性和纯合长腿雌性亲本杂交，根据子代表现型可判定基因A/a位于ZW同源区段还是仅位于Z染色体上C．选短腿雄性和杂合长腿雌性亲本杂交，根据子代表现型可判定基因A/a位于常染色体还是位于ZW同源区段D．选杂合长腿雄性和短腿雌性亲本杂交，根据子代表现型可判定基因A/a位于常染色体还是位于ZW同源区段【答案】D【解析】A．选短腿雄性和长腿雌性亲本杂交，若基因位于常染色体上，则后代雌雄性状相同，若基因仅位于Z染色体上，则后代雄性全为长腿，雌性全为短腿，A正确；B．选短腿雄性和纯合长腿雌性亲本杂交，若基因位于ZW同源区段，则亲代为ZaZa和ZAWA，子代不论雌雄全为长腿；若基因仅位于Z染色体上，则亲代为ZaZa和ZAW，则后代雄性全为长腿，雌性全为短腿，B正确；C．选短腿雄性和杂合长腿雌性亲本杂交，若基因位于常染色体上，则亲本组合为aa×Aa，后代不论雌雄均为长腿∶短腿＝1∶1；若位于ZW同源区段，则亲本组合为ZaZa和ZAWa或ZaZa和ZaWA，后代雌性全为短腿、雄性全为长腿或雌性全为长腿、雄性全为短腿，C正确；D．选杂合长腿雄性和短腿雌性亲本杂交，若基因位于常染色体上，则亲本为Aa×aa，后代不论雌雄均为长腿∶短腿＝1∶1；若基因位于ZW同源区段，亲本若为ZAZa和ZaWa，则后代不论雌雄均为长腿∶短腿＝1∶1，无法判定，D错误。故选D。第Ⅱ卷（非选择题）二、非选择题：包括必考题和选考题两部分。第7~10题为必考题，每个试题考生都必须作答。第11、12题为选考题，考生根据要求作答。（一）必考题：此题包括4小题，共39分。5
7．（9分）莲藕是被广泛用于观赏和食用的植物，研究人员通过人工诱变筛选出一株莲藕突变体，其叶绿素含量仅为普通莲藕的56%。下图表示在25℃时不同光照强度下该突变体和普通莲藕的净光合速率。据图回答下列问题：（1）藕的气腔孔与叶柄中的气腔孔相通，由此判断藕主要进行__________呼吸。叶片可通过细胞呼吸将储存在有机物中的稳定的化学能转化为___________。（2）图中光照强度低于a点时，突变体莲藕净光合速率低于普通莲藕，据题意推测引起这种差异的主要原因是___________。（3）图中光照强度大于a时，突变体莲藕的暗反应强度__________（填“低于”、“高于”或“等于”）普通莲藕，在2000lx的光照强度下，突变体莲藕总光合速率比普通莲藕____________（填“低”或“高”）。（4）为了得到图中的实验结果，实验的设计条件应包含（ ）①置于相同CO2浓度的环境②置于不同的光照强度③置于相同的湿度环境④植株样本足够⑤选用生长状况一致的植株【答案】（1）有氧（1分）ATP中活跃化学能和热能（答不全不给分）（2分）（2）突变体莲藕的叶绿素含量较低，光反应产生的ATP和[H]较少，光合速率低，并且两者呼吸速率相同（2分）（3）高于（1分）高（1分）（4）①②③④⑤（2分）【解析】（1）多孔的藕是莲的地下变态茎，它分化出许多气道，并与露出水面上的部分彼此贯通，形成一个输送气体的系统。于是从叶片孔吸收进来的氧气就可以向下运输到地下部分，满足地下部分有氧呼吸的需要。藕的气腔孔与叶柄中的气腔孔相通，由此判断藕主要进行有氧呼吸。叶片可通过细胞呼吸将储存在有机物中的稳定的化学能释放出来，小部分转化为ATP中活跃化学能，大部分转变为热能。（2）题干中说突变体莲藕的叶绿素含量较低，所以光反应产生的ATP和[H]较少，光合速率低，但是图中显示两者呼吸速率相同，所以光照强度低于a点时，突变体莲藕净光合速率低于普通莲藕。（3）图中光照强度大于a时，突变体莲藕的净光合速率大于普通莲藕，又因为二者呼吸作用强度一样，所以推测出突变体莲藕的总光合速率大于普通莲藕，但是题干中说莲藕突变体的叶绿素含量仅为普通莲藕的56%，说明莲藕突变体的光反应低于普通莲藕的，因此推出突变体莲藕的暗反应强度高于普通莲藕，看图可知在2000lx的光照强度下，突变体莲藕总光合速率比普通莲藕高。（4）为了得到图中的实验结果，实验设计自变量是不同的光照强度，实验的设计条件应包含①置于相同CO2浓度的环境、②置于不同的光照强度、③置于相同的湿度环境、④植株样本足够、⑤选用生长状况一致的植株。8．（10分）外泌体是细胞分泌到胞外的具膜囊泡，囊泡内含有蛋白质和RNA；NK细胞是一种免疫细胞，可杀伤肿瘤细胞；K562细胞是一种肿瘤细胞；白细胞介素-2是有免疫作用的物质，能加强免疫细胞的功能。某实验室为研究肺癌细胞外泌体对NK细胞功能的影响，进行了相关实验，结果见下图。回答下列问题：（1）外泌体以________的方式分泌到细胞外，该过程________（填“需要”或“不需要”）消耗能量。（2）研究发现，若以添加生理盐水为空白对照，K562细胞几乎不被NK细胞降解，说明白细胞介素-2能________（填“促进”或“抑制”）NK细胞杀伤肿瘤细胞。根据以上实验及图示结果，说明肺癌细胞外泌体能________（填“促进”或“抑制”）NK细胞杀伤肿瘤细胞。（3）NK细胞和K562细胞数量比从60∶1降低为30∶1，只添加白细胞介素-2的对照组中K562细胞降解率大致不变，而添加白细胞介素-2和外泌体的实验组中K562细胞降解率明显下降，请上述现象解释原因：_______________________________________。（4）科研人员为研究肺癌细胞外泌体内起作用的成分，分别灭活外泌体内的蛋白质和RNA成分，然后检测K562细胞降解率。若蛋白质灭活组中K562细胞降解率不变，RNA灭活组中K562细胞降解率__________，则说明肺癌细胞外泌体内起作用的成分是RNA。请解释原因：______________________________。5
【答案】（1）胞吐（1分）需要（1分）（2）促进（1分）抑制（1分）（3）在60∶1条件下，NK细胞的杀伤作用是饱和的；外泌体抑制了NK细胞的杀伤作用，K562细胞降解率会随NK细胞数量下降而下降（2分）（4）上升（1分）蛋白质灭活后，剩余的成分是RNA，而NK细胞的功能不受影响，说明蛋白质不发挥作用；RNA灭活后，剩余的成分是蛋白质，不能抑制NK细胞的功能，导致K562细胞降解率提高，说明RNA发挥作用（3分）【解析】（1）大分子物质进出细胞的方式是胞吞或者胞吐，外泌体是细胞分泌到胞外的具膜囊泡，囊泡内含有蛋白质和RNA，因此外泌体以胞吐的方式分泌到细胞外，该过程需要消耗能量，不需要载体蛋白。（2）据图可知，添加生理盐水为空白对照，K562细胞几乎不被NK细胞降解，与添加生理盐水相比，白细胞介素-2处理过后，K562细胞降解率升高，因此白细胞介素-2能促进NK细胞杀伤肿瘤细胞。据图可知，白细胞介素-2处理过后，肺癌细胞外泌体浓度升高，K562细胞降解率降低，说明肺癌细胞外泌体能抑制NK细胞杀伤肿瘤细胞。（3）在60∶1条件下，NK细胞的杀伤作用是饱和的；外泌体抑制了NK细胞的杀伤作用，K562细胞降解率会随NK细胞数量下降而下降，因此NK细胞和K562细胞数量比从60∶1降低为30∶1，只添加白细胞介素-2的对照组中K562细胞降解率大致不变，而添加白细胞介素-2和外泌体的实验组中K562细胞降解率明显下降。（4）灭活外泌体内的蛋白质和RNA成分，外泌体能抑制NK细胞杀伤肿瘤细胞，蛋白质灭活后，剩余的成分是RNA，而NK细胞的功能不受影响，说明蛋白质不发挥作用；RNA灭活后，剩余的成分是蛋白质，不能抑制NK细胞的功能，导致K562细胞降解率提高，说明RNA发挥作用，因此若蛋白质灭活组中K562细胞降解率不变，RNA灭活组中K562细胞降解率降低，则说明肺癌细胞外泌体内起作用的成分是RNA。9．（10分）随着城市化进程的加快，未经处理的生活污水、工业废水等直接进入湖泊，引起水体富营养化，最终导致水体恶化，生物多样性锐减。采用人工生态浮岛技术可对水体进行修复，请据图回答下列问题：（1）对该湖泊中动植物和微生物的数量和种类进行调查，属于________水平的研究。对湖泊中草鱼种群密度的调查应采用____________（方法）。湖泊近岸处和湖底处生物分布的差异体现了群落的_________（空间结构）。人工生态浮岛的建立使得该水域群落发生了_______演替。（2）建立人工生态浮岛一段时间后，还需定期收割植被的目的有_________（写出一点）。（3）建人工生态浮岛选择和搭配植物时，需要考虑的因素有____________________________________________（写出两点）。【答案】（1）群落（1分）标志重捕法（1分）水平结构（1分）次生（1分）（2）防止植物死亡后经微生物分解，将N、P重新释放到水体中；促进植被生长，吸收更多的N、P等矿质元素（3分）（3）植物净化水质的能力、植物是否适应水生环境和当地气候条件，植物之间的种间关系等（3分）【解析】（1）群落指同一区域内所有生物的集合，统计湖泊中动物、植物和微生物的种类及数量，属于群落水平的研究。对活动能力强、活动范围广的动物进行种群密度调查时，常采用标志重捕法，因此对湖泊中草鱼种群密度的调查应采用标志重捕法。群落的水平结构指群落的水平配置状况或水平格局，其主要表现特征是镶嵌性。湖泊近岸处和湖底处生物分布的差异体现了群落的水平结构。该水域群落中的土壤条件还保留着，因此从该水域群落演替成人工生态浮岛属于次生演替。（2）如果没有定期收割植被，则已经死亡的植物会在微生物等分解者的作用下被分解，从而把植物中的N、P重新释放到水体中，导致水体富营养化；同时定期收割植被，可以促进植被生长，让植物吸收更多的N、P等矿质元素。（3）根据题干可知，建立人工生态浮岛的目的是为了对水体进行修复，因此选择和搭配植物时，需要考虑植物净化水质的能力、植物是否适应水生环境和当地气候条件，植物之间的种间关系等。10．（10分）胰岛素样生长因子2是小鼠细胞的Igf-2基因控制合成的单链多肽分子，对个体生长､发育具有重要作用。Igf-2基因突变为Igf-2m后失去原有功能，使小鼠表现型除正常型外还产生了矮小型。据资料显示，该对等位基因位于常染色体上，遗传时有“基因印迹”现象，即子代中来自双亲的两个等位基因中只有一方能表达，另一方被印迹而不表达。请回答下列问题：（1）据此推断基因型为___________的小鼠一定表现为正常型，基因型为____________的小鼠一定表现为矮小型。（2）假设该基因印迹的规律为来自母方的基因被印迹不表达，请利用纯合的正常型和矮小型小鼠设计两组杂交实验证明此假设，用遗传图解表示。（3）如果被印迹不表达的基因来自母方，而来自父方的基因能表达。现有基因型为Igf-2Igf-2m（其母本基因型为Igf-2mIgf-2m）雌雄数量相等的的小鼠进行交配，其后代雌鼠的表现型及比例为___________________________。【答案】（1）Igf-2Igf-2（2分）Igf-2mIgf-2m（2分）5
（2）（4分）（3）正常型∶矮小型=1∶1（2分）【解析】（1）基因型为Igf-2Igf-2的小鼠，能够正常合成个体生长发育所需的胰岛素样生长因子2，一定为正常性。基因型为Igf-2mIgf-2m的小鼠，不具有合成胰岛素样生长因子2所需的基因，不能合成胰岛素样生长因子2，不能进行正常的生长发育，一定表现为矮小型。（2）要利用纯合的正常型和矮小型小鼠设计杂交实验，验证来自母方的基因被印迹不表达。可以设置为以下两组杂交实验：甲组：雄性正常型×雌性矮小型；乙组：雄性矮小型×雌性正常型。如果甲组子代均为正常型，乙组子代均为矮小型，说明来自母方的基因被印迹不表达。遗传图解如下：（3）数量相等的基因型为Igf-2Igf-2m的雌雄个体交配，相当于雄性群体产生的雄配子和雌性群体产生的雌配子随机结合，由于来自母方的基因被印迹，子代个体来自父方的基因两种类型，比例是1∶1，因此杂交后代的表现型比例是正常型∶矮小型=1∶1。（二）选考题：共15分。请考生从2道题中任选一题作答，并用2B铅笔将答题卡上所选题目对应的题号右侧方框涂黑，按所涂题号进行评分；多涂．多答，按所涂的首题进行评分；不涂，按本选考题的首题进行评分。11．【选一-生物技术实践】（15分）杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值和保健价值。下图是制作杨梅酒和杨梅醋的流程图。请回答下列问题。（1）传统发酵中，发酵液虽然未经过严格的灭菌处理，但杂菌却不能正常生长繁殖，这是由于果酒发酵的_______________条件抑制了杂菌的生长。（2）果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生酒精的场所是_______________，该阶段应该将温度控制在_______________；温度适宜时果酒发酵时间较短，原因是__________________________________________________。（3）杨梅醋的发酵过程中，除去必需的营养物质外，还需要往发酵液中持续地通入_____，发生的化学反应式是：_______________________________。（4）下图表示果酒发酵过程中，发酵液的糖度（葡萄糖的质量分数）和酒精度（酒精的体积分数）随时间变化的关系。发酵前24h，糖度变化很小，酒精度上升很慢，其原因是___________________________________。96h后酒精度和糖度的变化都趋于平缓，其原因是___________________________________。【答案】（除特别说明外，每空2分）（1）缺氧、酸性（2）细胞质基质（1分）18~25℃此时与果酒发酵相关的酶活性高，发酵速度快（3）无菌氧气（或无菌空气）C2H5OH+O2CH3COOH+H2O（4）此阶段酵母菌主要进行有氧呼吸，大量增殖营养物质消耗殆尽，高浓度的酒精和代谢废物会抑制酵母菌的代谢而影响发酵【解析】（1）分析题意可知，果酒发酵时需要无氧条件，且发酵液pH值会逐渐降低，即发酵液变酸，这种缺氧、酸性条件能抑制杂菌的生长。（2）酵母菌是真核生物，其无氧呼吸产生酒精的场所是细胞质基质。利用酵母菌进行发酵时，应将温度控制在18~25℃，在此温度条件下，酵母菌内与果酒发酵相关的酶活性高，发酵速度快。（3）由分析可知，醋酸菌是一种好氧细菌，故杨梅醋的发酵过程中，需要向发酵液中持续通入无菌氧气（无菌空气），此时发生的化学反应式是C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。（4）分析题图可知，随着发酵的进行，发酵液的糖度逐渐降低，酒精度逐渐升高然后保持相对稳定。发酵前24h，酵母菌主要进行有氧呼吸，大量增殖，消耗葡萄糖较少，因此糖度变化很小，酒精度上升很慢。随着发酵的进行，酵母菌进行无氧呼吸消耗葡萄糖产生酒精，96h后，营养物质消耗殆尽，高浓度的酒精和代谢废物会抑制酵母菌的代谢而影响发酵，导致酒精度和糖度的变化都趋于平缓。12．【选三-现代生物科技】（15分）科研工作者将径柳匙叶草液泡膜Na+/K+5
逆向转运蛋白基因（TaNHX2基因）转移到棉花细胞内，获得了耐盐新品种。图1是含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI为三种限制酶（Sau3AI、BamHI切割形成的粘性末端相同）；图2是农杆菌Ti质粒结构示意图。请分析回答问题：（1）将径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因，这种获取目的基因的方法称为____________。（2）计划用EcoRI分别切割图1中DNA片段和图2所示质粒，以构建基因表达载体。①构建表达载体需要的工具酶是_____________、______________。②本方案的缺陷是：可能导致___________________以及目的基因与质粒的反向连接。③为避免上述缺陷，最佳方案是用________切割图1的DNA，用_______切割图2质粒。（3）目的基因成功导入受体细胞后，还需要利用_________________技术才能得到转基因棉花苗，这一技术的原理是_________________。【答案】（除特别说明外，每空2分）（1）从基因文库中获取目的基因（2）①限制酶DNA连接酶②目的基因和质粒的自我环化③EcoRI、BamHIEcoRI、Sau3AI（3）植物组织培养（1分）细胞的全能性【解析】（1）获取目的基因的方法有：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成法，而将径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因，这种获取目的基因的方法称为从基因文库中获取目的基因。（2）①构建表达载体除限制酶外还需要的工具酶是DNA连接酶；②用EcoRI分别切割图1中DNA片段和图2所示质粒，由于只有一种黏性末端，可能导致目的基因和质粒的自我环化以及目的基因与质粒的反向连接。③已知Sau3AI、BamHI切割形成的粘性末端相同，由图可知在目的基因两侧有EcoRI、BamHI的识别位点，在质粒上有Sau3AI、EcoRI的识别位点，故为避免目的基因和质粒的自我环化以及目的基因与质粒的反向连接，最佳方案是用两种限制酶EcoRI、BamHI切割图1的DNA，用EcoRI、Sau3AI切割图2质粒。（3）目的基因成功导入受体细胞后，要想得到转基因棉花苗，还需要利用植物组织培养技术，这一技术的原理是植物细胞的全能性。5
