胚胎工程\n课前自主预习案高效课堂课堂总结历届真题\n课前自主预习案\n素能目标★考向导航\n基础梳理——系统化知识点一 受精和早期胚胎发育1．胚胎工程的概念早期胚胎细胞雌性动物自然受精早期胚胎发育\n2．受精（1）概念：精子与卵子结合形成（受精卵）的过程。（2）场所：哺乳动物的受精在雌性动物的内。（3）过程合子输卵管MⅡ期卵细胞膜雄原核雌原核受精卵\n3．胚胎早期发育有丝分裂各种组织胎膜和胎盘\n知识点二 胚胎工程技术及其应用一、体外受精1．过程2．意义：（1）提高动物。（2）为胚胎移植提供。成熟培养获能繁殖能力胚胎\n二、胚胎移植1．概念：将通过及其他方式得到的胚胎，移植到的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。2．操作过程体外受精超数排卵同种的、生理状态相同桑葚胚或囊胚妊娠\n轻巧识记归纳巧记胚胎移植的两个“两次”①胚胎移植过程中两次激素使用：第一次常用孕激素对受、供体进行同期发情处理；第二次用促性腺激素处理供体，使其超数排卵。②胚胎移植过程中有两次检查：第一次对收集的胚胎进行检查，第二次对受体母畜是否妊娠进行检查。\n三、胚胎分割1．材料：应选择发育良好、形态正常的或囊胚。2．实质：胚胎分割可增加动物后代的数量，其实质是动物的（或克隆）。3．操作要求：对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将均等分割。桑葚胚无性繁殖内细胞团遗传性状性别鉴定\n基能过关——问题化一、判一判（判断正误并找到课本原话）（一）胚胎工程的理论基础1．动物排出的卵子成熟程度不同，有的可能是初级卵母细胞，有的可能是次级卵母细胞。（选择性必修3P57正文）（ ）2．卵子发育到MⅡ期，才具备与精子受精的能力。（选择性必修3P57正文）（ ）3．在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜内的透明带会迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带。（选择性必修3P57正文）（ ）4．精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核。（选择性必修3P57图2－20）（ ）5．胚胎发育过程中，囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化。（选择性必修3P58正文）（ ）√√√√×\n（二）胚胎工程技术及其应用1．哺乳动物的体外受精技术主要包括卵母细胞的采集、精子的获能和受精等步骤。（选择性必修3P60正文）（ ）2．通过转基因、核移植和体外受精获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。（选择性必修3P61正文）（ ）3．胚胎移植中通常选遗传性状优良、生产能力强的受体母牛，选有健康体质和正常繁殖能力的供体母牛。（选择性必修3P61图2－23）（ ）4．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。（选择性必修3P62思考·讨论）（ ）5．胚胎分割过程中，可取滋养层细胞做DNA分析，鉴定性别。（选择性必修3P63图2－25）（ ）√√√√×\n二、议一议【教材易漏拾遗】1．[选择性必修3P57正文发掘]防止多精入卵的屏障有哪些？有什么意义？提示：两道屏障防止多精入卵：精子接触卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带；精子入卵后，卵细胞膜立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内。这两道屏障可以保证受精卵中遗传物质与亲代体细胞一致，从而保证遗传的稳定性。\n2．[选择性必修3P58正文发掘]胚胎发育过程中哪些细胞具有全能性？并分析各种细胞全能性的大小。提示：个体发育过程中从囊胚阶段开始初步分化，分化出内细胞团和滋养层细胞，囊胚之前细胞未分化，为全能细胞，囊胚之后的原肠胚阶段细胞分化程度高，但仍有全能细胞。受精卵是新生命的第一个细胞，其全能性最高。细胞全能性随发育的深化而降低。\n3．[选择性必修3P59“概念检测”2题拓展]（1）早期胚胎发育中，胚胎内部出现的含有液体的腔叫作什么，出现在什么时期？（2）具有全能性的早期胚胎时期有哪些？提示：(1)囊胚腔；囊胚期。提示：(2)桑葚胚期及其之前的所有时期。\n4．[选择性必修3P60正文发掘]刚刚采集到的哺乳动物的精子和卵子能立刻受精吗？为什么？提示：不能。精子要获能后才具有受精能力，卵子必须进一步成熟，到MⅡ期时，才能受精。\n5．[选择性必修3P62正文发掘]对囊胚阶段的胚胎进行分割时，为什么要将内细胞团均等分割？提示：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。\n高效课堂\n考点一 受精与胚胎早期发育任务驱动·探究突破任务1完善受精过程中的“三大反应”“两道屏障”\n受精过程的四个易混点(1)精子获能是指精子获得受精“能力”，而不是获得能量。(2)排卵是指卵子从卵泡中排出，而不是卵泡从卵巢中排出。(3)受精的标志不等于受精完成的标志。受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到两个极体；而受精过程完成的标志是雌、雄原核的融合。(4)受精卵遗传物质的来源：核遗传物质来自精子的细胞核与卵细胞的细胞核(即精卵各提供1/2)，而细胞质的遗传物质几乎全部来自卵细胞。\n任务2卵裂期胚胎发育过程中物质和体积变化的规律(1)有机物：胚胎没有和母体建立联系，不能从母体获取有机物，而呼吸消耗一直进行，因此有机物总量_____。(2)细胞数目和体积：胚胎总体积不变或略有减小，但细胞数目_____，每个细胞体积_____。(3)细胞中DNA含量：伴随细胞分裂，细胞数目增多，总DNA含量_____，但每个细胞中核DNA含量____________。减少增多减小增多保持相对稳定\n考向一受精过程的考查1.[经典高考]哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图(N表示染色体组)。据图分析，下列叙述错误的是()A．次级卵母细胞形成的过程需要激素调节B．细胞Ⅲ只有在精子的作用下才能形成成熟卵子C．Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ细胞分裂后期染色体数目相同D．培育转基因动物应选择细胞Ⅳ作为受体细胞答案：C\n解析：据图可知，初级卵母细胞在形成次级卵母细胞的过程中需要促性腺激素处理，A正确；细胞Ⅲ为次级卵母细胞，减数分裂Ⅱ是在输卵管中伴随着受精作用完成的，B正确；Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ分别为初级卵母细胞、次级卵母细胞和受精卵，它们在细胞分裂后期的染色体组数依次为：2N、2N、4N，染色体数不同，C错误；动物细胞的受精卵全能性高，因此培育转基因动物常用受精卵作为受体细胞，D正确。\n2．(不定项选择)如图为受精作用及胚胎发育示意图，a、b代表两个发育时期，下列叙述正确的是()A.①过程主要包括：精子穿越透明带，进入卵细胞膜，原核形成和融合B．a、b分别是囊胚和原肠胚时期C．①～④过程都没有发生细胞分化D．b阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞答案：AB\n解析：①为受精，该过程主要包括：精子穿越透明带，进入卵细胞膜，原核形成和融合，A正确；a、b分别是囊胚和原肠胚时期，B正确；①～④过程中，③④过程都会发生细胞分化，C错误；b为原肠胚，其前一个阶段是囊胚阶段，囊胚中的滋养层细胞不是全能细胞，D错误。\n考向二胚胎早期发育过程考查3.[2022·北京海淀实验中学月考]如图为受精作用及早期胚胎发育示意图，下列叙述错误的是()受精卵桑葚胚囊胚原肠胚―→幼体A．①过程需依赖细胞表面糖蛋白识别B．②过程通过有丝分裂方式增殖C．③过程细胞的“核/质”比逐渐变小D．④过程细胞的基因表达发生了差异答案：C\n解析：①为受精过程，该过程需要依赖细胞表面糖蛋白识别，A正确；②为卵裂过程，该过程通过有丝分裂方式增殖，B正确；细胞卵裂过程中，单个细胞体积减小，但核物质(DNA)不变，因此核/质比增大，C错误；④过程中发生细胞分化，而细胞分化的实质是基因表达发生了差异，D正确。\n4．(不定项选择)如图表示高等动物的个体发育过程，下列说法不正确的是()A．图中①过程表示胚胎发育，②过程表示胚后发育B．受精卵卵裂处于囊胚形成的过程中，每个细胞的体积不断增大C．兔子、雄鹰和眼镜蛇在个体发育过程中会出现羊膜D．原肠胚期是进行胚胎移植的最好时期答案：ABD\n解析：由受精卵发育为幼体的过程是胚胎发育，由幼体发育为成体的过程是胚后发育，A错误；卵裂形成的囊胚总体积基本不变，而每个细胞的体积减小，B错误；兔子、雄鹰和眼镜蛇分别是哺乳类、鸟类和爬行类动物，都是真正的陆生脊椎动物，羊膜和羊水能保证其胚胎发育所需的水环境，还具有防震和保护作用，C正确；原肠胚期已发生了细胞的分化，最好在早期胚胎时进行移植，如牛、羊一般在桑葚胚或囊胚阶段移植，而其他生物要在更早阶段进行，D错误。\n考点二 胚胎工程技术及其应用任务驱动·探究突破任务1比较自然受精、人工授精和体外受精项目自然受精人工授精体外受精不同点过程不同雌雄动物____完成用_____的方法将公畜的精液注入母畜生殖道内，完成受精人工获取精子、卵子，在____________中完成受精过程场所不同雌性动物________中雌性动物________中体外________中相同点(1)精子获能、卵子成熟后方能完成受精过程；(2)都是_____生殖交配人工体外培养液输卵管输卵管培养液有性\n动物排出卵子的成熟程度不同，有的可能是次级卵母细胞，如猪、绵羊等；有的可能是初级卵母细胞，如马、犬等，但它们都要在输卵管内进一步成熟，当达到减数分裂Ⅱ期时，才具有与精子受精的能力。\n任务2完善胚胎工程的操作流程示意图，并填空同期发情超数冲卵胚胎移植\n(1)对供体牛要进行________处理；对供、受体牛要进行________处理。(2)排卵是指卵子从______中排出，冲卵是指把供体母牛子宫内的________冲洗出来。(3)动物的早期胚胎一般发育到________或_____阶段才能进行移植。(4)若要获得多个遗传物质完全相同的新个体，可对检查合格的胚胎用胚胎分割技术处理，该过程属于________或克隆。超数排卵同期发情卵泡早期胚胎桑葚胚囊胚无性繁殖\n任务3试管动物与克隆动物的比较比较项目试管动物克隆动物技术基础体外受精、早期胚胎培养________核移植技术、________、______________实例试管牛多莉羊胚胎移植细胞培养胚胎(分割)移植\n过程\n生殖方式____生殖____生殖遗传物质遗传物质来自____个个体遗传物质大部分来自_____生物体意义充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，______供体本身的繁殖周期加速家畜遗传改良进程、挽救濒危物种等有性无性两供核缩短\n(1)试管动物生殖的实质是正常的有性生殖，只不过受精、早期胚胎发育在体外进行。(2)克隆动物生殖的实质是无性生殖，依赖动物细胞核(高度分化的体细胞的细胞核)具有全能性；特有的操作程序是核移植。\n任务4完成胚胎分割、核移植和胚胎移植的比较项目区别胚胎分割核移植胚胎移植胚胎来源雌性动物________或________形成的早期胚胎、其他方式得到的胚胎经__________得到的胚胎雌性动物_________或__________形成的早期胚胎、其他方式得到的胚胎生殖方式_____生殖____生殖有性生殖或无性生殖后代遗传特点相同相同__________体内受精体外受精体细胞核移植体内受精体外受精无性无性不一定相同\n考向分类·对点落实考向一对体外受精过程的分析1.[经典模拟]如图表示通过体外受精培育牛的过程，下列叙述错误的是()A．获取的精子经获能后才能进行体外受精B．②过程只与细胞膜的流动性有关C．③过程的细胞增殖方式是有丝分裂D．④过程属于胚胎移植答案：B\n解析：在进行体外受精时，获取的精子需获能后才能进行体外受精；图中的②过程是受精作用，该过程涉及精卵细胞的识别、细胞膜的融合(与膜的流动性有关)、核的融合等；③过程是卵裂过程，该过程的细胞增殖方式是有丝分裂；④过程是将早期胚胎移入受体子宫的过程，属于胚胎移植过程。\n2．下列关于卵子采集的叙述中不正确的是()A．有些动物在采集时要用促性腺激素处理B．从输卵管中取出的成熟卵子，可直接与获能的精子在体外受精C．对有些动物可以直接从活体卵巢中吸取卵母细胞D．在卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子在体外受精答案：D解析：对于实验动物如小鼠以及家畜猪等，采用的主要方法是用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精，故A、B正确；对于大家畜或大型动物，可以直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞，采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，故C正确，D错误。\n考向二早期胚胎培养和胚胎移植的条件和过程分析3.[2022·北京四中高三月考]小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，其制备流程如图所示。下列叙述正确的是()A．为获得更多的囊胚，可采用激素注射以促进雄鼠产生更多的精子B．细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后即可获得分散的胚胎干细胞D．胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养答案：D\n解析：为了获得更多的囊胚，可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的，故核基因相同，B错误；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞，首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；动物细胞培养时需要在含5%CO2的培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。\n4．(不定项选择)下列关于胚胎移植的叙述，不正确的是()A．胚胎移植的优势是可以充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力B．胚胎移植过程中冲卵的操作是选择特定装置将卵子冲出来C．胚胎移植过程中受体母畜必须经过免疫学检验以防止排斥外来胚胎D．转基因、核移植、体外受精等技术获得的胚胎都必须移植给受体才能获得后代答案：ABC解析：胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；胚胎移植过程中冲卵的操作是选择特定装置将早期胚胎冲出来；大量的研究已经证明，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。\n5．(不定项选择)梅花鹿属于单胎动物，季节性发情，育种工作者希望通过胚胎工程技术对优良品种进行扩大繁殖。下列有关叙述错误的是()A．给供体母鹿注射促性腺激素可使其一次排出多个卵子B．培养早期胚胎的培养液中含有维生素、激素等多种能源物质C．当受体数量有限时，可采用胚胎分割技术以获得更多的后代D．梅花鹿的胚胎形成后一直处于游离状态，为胚胎收集提供可能答案：BCD解析：给供体母鹿注射促性腺激素可使其一次排出多个卵子，A正确；维生素、激素都不是能源物质，B错误；梅花鹿属于单胎动物，因此当受体数量有限时，无法通过胚胎分割技术获得更多的后代，C错误；梅花鹿的胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于游离状态，这为胚胎的收集提供了可能，D错误。\n考向三胚胎分割过程分析及应用6.(不定项选择)下列关于胚胎分割的叙述，正确的是()A．可以将胚胎任意分割成多块B．胚胎分割是一种有性生殖C．胚胎分割后，移植获得的后代基因型完全相同D．胚胎分割是在动物体外进行的，且不能无限分割答案：CD解析：胚胎分割可以看做无性生殖，它所形成的后代基因型完全相同，遗传性状极为相似。胚胎分割是在动物体外进行的操作，但不能无限分割。\n考向四胚胎工程的应用7.(不定项选择)2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述正确的是()A．该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B．捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C．三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D．三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术答案：ABD\n解析：“三亲婴儿”的线粒体基因来自捐献者，A正确；红绿色盲基因位于X染色体上，捐献者只将细胞质基因遗传给该婴儿，B正确；“三亲婴儿”的染色体来自母亲卵母细胞的细胞核与父亲精子的细胞核，C错误；体外受精获得受精卵，先在体外培养到桑葚胚或囊胚，再进行胚胎移植，D正确。\n8．[2022·广东汕头模拟]如图表示转基因牛的培育过程，请据图分析回答下列问题。\n(1)①过程为________________。(2)体外培养胚胎干细胞时，通常要加入_____等一些天然成分，除了要保证被培养细胞处于无菌、无毒及氧气充足的环境中，还需要保证细胞生活所需适宜的______和____。(3)②过程是将细胞注入图中囊胚的_________位置，母牛A和B需要用激素进行处理使其__________。(4)为获得较多基因型相同的犊牛，常采用________的方法。③过程是________，实际上是____________________________________的过程。基因表达载体的构建血清温度pH内细胞团同期发情胚胎分割胚胎移植早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移\n解析：(1)①过程为被酶切割的载体和目的基因构建基因表达载体。(2)动物细胞培养液的成分包括糖、氨基酸、无机盐、微量元素和动物血清等。动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养物质(合成培养基)；温度和pH(36.5±0.5℃，7.2～7.4)；气体环境(氧气和二氧化碳)等。(3)从图中分析可知，含有目的基因的胚胎干细胞应注入囊胚的内细胞团，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织。供体母牛和受体母牛需要进行同期发情处理。(4)为获得较多基因型相同的胚胎可采用胚胎分割的方法。胚胎移植实际上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。\n课堂总结\n[网络建构提升]体外受精胚胎移植胚胎分割\n[长句应答必备]1．受精过程：获能的精子穿过放射冠和透明带→精卵通过细胞表面的糖蛋白相互识别→精子遗传物质进入卵细胞。2．胚胎发育过程：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体。3．体外受精过程4．胚胎移植的基本程序：对供、受体的选择和处理→配种或进行人工授精→对胚胎的收集、检查、培养或保存→胚胎移植→移植后检查。\n历届真题\n[等级选考研考向]1．[2020·海南卷]下列关于人体造血干细胞的叙述，错误的是()A．造血干细胞比胚胎干细胞的分化程度高B．造血干细胞分化产生的B细胞在胸腺中发育成熟C．造血干细胞可不断增殖和分化，捐献造血干细胞不影响人体健康D．造血干细胞移植是治疗白血病的有效手段答案：B解析：造血干细胞可以分化成红细胞、白细胞和血小板，胚胎干细胞可以分化为任何一种组织细胞，所以造血干细胞分化程度更高，A正确；造血干细胞分化产生的T细胞在胸腺中发育成熟，B细胞在骨髓中成熟，B错误；骨髓中的造血干细胞可不断增殖和分化，不断产生红细胞、白细胞和血小板，补充到血液中去，所以捐献造血干细胞不影响人体健康，C正确；造血干细胞移植可以取代白血病患者病变的造血干细胞，是治疗白血病的有效手段，D正确。\n2．[经典高考]某课题组为解决本地种奶牛产奶量低的问题，引进了含高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。(1)拟进行如下杂交：♂A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C，选择B作为母本，原因之一是胚胎能在母体内正常_______________。若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并未提高，说明高产奶是____性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是________，后代中出现这种母牛的概率是_____(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。生长发育(或胚胎发育)隐性♂A×♀C1/8\n解析：(1)由于胚胎需要在母体内正常生长发育，所以应选择B作为母本。若子代母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并未提高，说明适宜本地生长是显性性状(设基因为M)，高产奶是隐性性状(设基因为n)。则♂A基因型是mmnn，♀B基因型是MMNN，♀C基因型是MmNn，为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛(M_nn)，可选择♂A和♀C进行杂交，后代出现该种母牛的概率是1/2×1/2×1/2＝1/8。\n(2)用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。精子要具有受精能力，需对其进行_____处理；卵子的成熟在过程_____中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖，其作用是______。为筛选出具有优良性状的母牛，过程⑤前应鉴定胚胎的________________________。子代母牛的优良性状与过程____的基因重组有关。(3)为了提高已有胚胎的利用率，可采用________技术。获能③供能性别、高产奶和适应生长的基因②胚胎分割\n解析：(2)精子经过获能处理才具有受精能力，卵子的成熟发生在受精过程中，即过程③。胚胎培养所需的培养基中含有葡萄糖，葡萄糖氧化分解可提供能量。具有优良性状的母牛含有高产奶和适应生长的基因，则胚胎移植前应进行鉴定，同时还需鉴定性别。基因重组发生在减数分裂过程中，该过程可使控制不同性状的基因重新组合。由于供体公牛是纯合子，不会发生基因重组，供体母牛是杂合子，则子代母牛的优良性状与供体母牛产卵过程中的基因重组有关。(3)为提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术，增加胚胎的数量。\n[国考真题研规律]3．[2020·全国卷Ⅲ]W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。\n回答下列问题：(1)步骤①中需要使用的工具酶有__________________________。步骤②和③所代表的操作分别是_________和________。步骤④称为__________。(2)与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W的优势在于不受转基因动物的___________(答出2点即可)的限制。(3)一般来说，在同一动物个体中，乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传信息______(填“相同”或“不同”)，原因是________________________________________。(4)从上述流程可知，制备生物反应器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技术有_________________(答出2点即可)。限制性核酸内切酶、DNA连接酶显微注射体外培养胚胎移植性别、年龄相同两种上皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵体外受精、胚胎移植\n解析：(1)在基因表达载体的构建过程中需要使用限制性核酸内切酶切割W基因和载体，同时需要DNA连接酶进行连接。将基因表达载体导入受精卵常用显微注射法，从受精卵到早期胚胎需要进行体外培养，将获得的早期胚胎通过胚胎移植移至代孕母体体内。(2)乳腺生物反应器和膀胱生物反应器都属于动物反应器，前者受动物性别(只能是雌性)和年龄(哺乳期)的限制，后者不受动物性别和年龄限制。(3)题中两种上皮细胞都是体细胞，且来源于同一个受精卵，所以其细胞核中染色体DNA所含遗传信息相同。(4)胚胎工程中所用到的技术主要有体外受精、胚胎移植。
