选修1 生物技术实践考点33 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用两年高考真题演练1．(2022·课标卷Ⅰ，39)已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用________法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。2．(2022·广东卷，29)泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害，某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”，查阅资料得到下图。(1)制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是________，乳酸菌发酵第一阶段的产物有________。(2)据上图，与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用，因为后者________；pH值呈下降趋势，原因是_____________________。(3)该小组得到一株“优选”乳酸菌(亚硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍)，拟参照资料的实验方案和食盐浓度(4%～10%)，探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定其最适条件，请你设计一个实验结果记录表，并推测实验结论。3．(2022·高考新课标全国卷Ⅰ，T39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶。其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获31\n得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲＋＋＋＋－＋＋培养基乙＋＋＋－＋＋＋据表判断，培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_______________________________；培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_____________________________________。4．(2022·高考新课标全国卷Ⅱ，T39)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_____________________________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为________。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是____________________________________________________________________________________________________。(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。考点33 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用一年模拟试题精练1．(2022·江西五校第一次联考)无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：31\n(1)消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理________。①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀A．①②③⑧⑨B．④⑤⑥⑦⑩C．①②③④⑤⑥⑧D．以上全部(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行________，接种前要进行________，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是________。右图是利用________法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：①每次划线前要___________________________________；②冷却后从上一区划线末端开始划；③首尾区________________________________________。(4)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是____________________________，观察培养基上是否有菌落产生。(5)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌，也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入______________。(6)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是___________________________。2．(2022·湖北颚南高中等三校5月联考)有些细菌可以分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常采用的灭菌方法有干热灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以____________________________________。3．(2022·广西柳州3月模拟)Ⅰ.腐乳的制作流程如下图所示，请据图回答下列问题。―→―→―→(1)现代科学研究表明，许多种微生物参与了豆腐的发酵，31\n其中起主要作用的是_______________________________________。(2)腐乳制作的原理是上述微生物产生的蛋白酶有将豆腐中的蛋白质分解成________和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。(3)现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，________________________。(4)加盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐变硬；________，避免豆腐变质。(5)卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。加酒的作用能使腐乳具有独特的香味和_______________________________。Ⅱ.下图是泡茶的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图分析回答下列问题。(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是________________________________________________________________________。(2)制备泡菜的盐水中，清水与盐的质量比为________，盐水煮沸的目的是为了杀灭杂菌，冷却后再使用的目的是为了保证________等微生物的生命活动不受影响。(3)泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，发霉主要与________有关。(4)测定亚硝酸盐含量的方法是___________________________。4．(2022·山西第四次四校联考)苹果素来享有“水果之王”的美誉，种植苹果可获得很好的经济效益。但品相不好的苹果很难销售。某生物小组的同学们为了让品相不好的苹果能够产生更大的经济效益设计了下面的实验。请据图回答问题。＋―→(1)在过程①中使用的微生物的繁殖方式是________，在过程①主要发生的反应_______________________________________(请写出化学反应式)。(2)在过程①②中实验操作有哪些区别_________________________________________________。(3)过程②中使用的微生物是________，该微生物的代谢类型是________。(4)在整个果酒果醋的制作过程结束后与操作开始前相比较有机物的种类________，有机物的总量________。(5)果醋发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，31\n酒香逐渐变成醋香。右图中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是( )A．① B．②C．③D．④31\n考点34 酶的应用及生物技术在其他方面的应用两年高考真题演练1．(2022·课标卷Ⅱ，39)回答与胡萝卜素有关的问题：(1)胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是________(填“α胡萝卜素”“β胡萝卜素”或“γ胡萝卜素”)，该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子________，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为________，胡萝卜素是________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。(2)工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是________________。2．(2022·山东卷，35)乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：→→→(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用________作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是________________。从功能上讲，这种培养基属于________。(2)培养微生物L前，宜采用________方法对接种环进行灭菌。(3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越________。(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的________确定其应用价值。除化学结合法外，酶的固定化方法还包括________、________、离子吸附法及交联法等。3．(2022·海南卷，30)生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁量。回答下列相关问题：(1)某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶酶的活性的平均值并进行比较。这一实验的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)现有一种新分离出来的果胶酶，为探究其最适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别加入等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0℃、5℃、10℃、40℃下保温相同时间，然后，测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量平均值。该实验温度设置的不足之处有________和________。(3)某同学取5组试管(A～E)分别加入等量的同种果泥，在A、B、C、D4个实验组的试管中分别加入等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组加入蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过A～D组实验可比较不同实验组出汁量的差异。本实验中，若要检测加入酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计________(填“能”或“不能”)达到目的，其原因是______________________________。4．(2022·高考江苏卷，T29)为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题：(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为________。31\n(2)在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如上图所示。细胞干重在12d后下降的原因有________________________________________________________________________；培养液中蔗糖的作用是________________、________________。(3)多倍体愈伤组织细胞中产生的次生代谢产物量常高于二倍体。二倍体愈伤组织细胞经________处理，会产生染色体加倍的细胞。为检测愈伤组织细胞染色体数目，压片前常用纤维素酶和________酶解离愈伤组织。若愈伤组织细胞(2n)经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，合理的解释是________________、________________。(4)为了更好地获得次生代谢产物，生产中采用植物细胞的固定化技术，其原理与酵母细胞固定化类似。下列说法正确的有________(填序号)。①选取旺盛生长的愈伤组织细胞包埋②必须在光照条件下培养③培养过程中需通空气④固定化后植物细胞生长会变慢考点34 酶的应用及生物技术在其他方面的应用一年模拟试题精练1．(2022·河南濮阳第二次模拟)某校生物兴趣小组设计了有关胡萝卜的一系列实验，大致流程如下：请回答：(1)配制①过程的培养基分装后要进行_________________。其中生长素用量与细胞分裂素用量比值应________，以促进愈伤组织的生长。(2)接种前，要对胡萝卜切块进行________________。若在培养几天后，发现少数培养基上长出有光泽的黏液状菌落，这属于________污染。(3)图1为从胡萝卜中提取胡萝卜素的装置，常用的方法是________法，其效率主要取决于________。31\n(4)装置③的作用是______________。胡萝卜在加入装置④前，一般要进行粉碎、________处理。处理时应注意______________，否则会导致胡萝卜素分解。一般情况下，提取效率与颗粒含水量成________比。(5)采用装置⑤的目的是_____________________________。(6)图2为胡萝卜素的纸层析结果示意图，图中B胡萝卜素是________________。就实验目的而言，该纸层析鉴定法与“叶绿体中色素的提取和分离”实验中的层析法不同点是________________________________________________________________________。2．(2022·江西景德镇第二次质检)某年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。(1)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是________法，用这种方法提取橘皮精油的主要步骤是：石灰水浸泡、漂洗、________、________、静置、________。(2)橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料________和有效成分________等问题。(3)在提取橘皮精油时，橘皮在石灰水中的浸泡时间为________以上，并且橘皮要浸透，这样最后才会得到高的出油率。(4)从橘皮中提取的橘皮精油的特点是____________________，具有诱人的橘香味。(5)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大量繁殖，组织培养的选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败。若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至________期的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有________法，某些植物的花粉不易着色，需采用________法。(6)影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有________和________。请解释橘树上的细胞不离体便不能长成完整植株的根本原因：____________________________________________。3．(2022·河南开封模拟)下图表示菊花的嫩枝和月季的花药的离体培养过程，请据图回答下面的问题。(1)对菊花来说，要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，其原因是__________________________________________________，对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于________期。为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是________。(2)在培养嫩枝组织和花粉的培养基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有________。31\n(3)某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌。为了避免微生物对培养造成的影响，所以在进行接种时应注意________________________。①接种室要消毒②只要戴口罩，操作时便可说话③外植体可预先用体积分数为70%的酒精浸泡，取出用无菌水冲洗后，再用0.1%的氯化汞溶液消毒，并用无菌水冲洗干净④接种操作要在酒精灯火焰旁进行⑤接种完毕应立即盖好瓶盖A．①②③④⑤B．①②③④C．①③④⑤D．②③④⑤(4)月季的花药培养与菊花的嫩枝组织培养不同，从植物产生的途径来说，花粉植株产生的途径除了图中所示外，还可以通过________阶段发育而来，这两种发育途径的差别主要取决于________。(5)不同植物对各种条件的要求往往不同，进行菊花组织培养一般将温度控制在________℃，并且对光照的控制为________。选修3 现代生物科技专题考点35 基因工程与细胞工程两年高考真题演练1．(2022·课标卷Ⅰ，40)HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时，可先提取HIV中的________，以其作为模板，在________的作用下合成________，获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是________，该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是________。(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分________细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。(4)人的免疫系统有________癌细胞的功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。2．(2022·课标卷Ⅱ，40)已知生物体内有一种蛋白质(P)，该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题：(1)从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的________进行改造。(2)以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰________基因或合成________基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括________的复制，以及遗传信息在不同分子之间的流动，即：________。(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，31\n通过________和________，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物________进行鉴定。3．(2022·福建卷，33)GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是________。(2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的________限制酶进行酶切。(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行________培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。4．(2022·天津卷，8)纤维素分子不能进入酵母细胞。为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了3种不同基因片段的重组质粒。下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。31\n据图回答：(1)本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如下图。为防止酶切片段的自身连接，可选用的限制酶组合是________或________。A．①②B．①③C．②④D．③④(2)设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证________不携带纤维素酶基因。(3)纤维素酶基因的表达包括________和________过程。与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有________。(4)在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株________不能存活，原因是____________________________。(5)酵母菌生成酒精的细胞部位是________，产生酒精时细胞的呼吸方式是________。在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具优势，因为导入的重组质粒含有________，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率。5．(2022·四川卷，9)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示(注：农杆菌中Ti质粒上只有TDNA片段能转移到植物细胞中)。(1)过程①需用同种________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用________培养基。(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让________进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是________________________________。(3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是________________________________________________________________________。(4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是________。种植转基因抗虫棉能减少________的使用，以减轻环境污染。6．(2022·天津卷，7)DHA对脑神经发育至关重要。以A、B两种单细胞真核藻为亲本，利用细胞融合技术选育高产DHA融合藻。两种藻特性如下表。亲本藻优势代谢类型固体培养基上藻落直径A藻自养0.06小0.7B藻异养0.14大无据表回答：(1)选育的融合藻应具有A藻________与B藻________的优点。(2)诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻，其目的是获得________________________________________________________________________。31\n(3)通过以下三步筛选融合藻，步骤________可淘汰B藻，步骤________可淘汰生长速率较慢的藻落，再通过步骤________生产所需的融合藻。步骤a：观察藻落的大小步骤b：用不含有机碳源(碳源——生物生长的碳素来源)的培养基进行光照培养步骤c：测定DHA含量(4)以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组试验，结果如下图。①甲组条件下，融合藻产生[H]的细胞器是________；丙组条件下产生ATP的细胞器是________。②与甲、丙两组相比，乙组融合藻生长速率较快，原因是在该培养条件下__________________________________________。甲、乙两组DHA产量均较高，但实际生产中往往采用甲组的培养条件，其原因是_________________________________________________________________________________________________________。7．(2022·高考新课标全国卷Ⅰ，T40)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原—抗体反应的血清最大稀释倍数)，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条)，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：(1)制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是________小鼠，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有____________________________________，体系中出现多种类型细胞的原因是___________________________________________________________________________________________。(3)杂交瘤细胞中有________个细胞核，染色体数目最多是________条。31\n(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是________________________________________________________________________。31\n考点35 基因工程与细胞工程一年模拟试题精练1．(2022·河北省“五个一名校联盟”质量监测)下图为含铁量较高转基因水稻的培育过程示意图，请分析回答：注：MS培养基为植物组织培养所用培养基(1)铁结合蛋白基因来自菜豆，若利用菜豆细胞内形成的mRNA通过逆转录过程形成cDNA，将这些cDNA用限制酶处理后储存在受体菌群体内，这些受体菌群被称为菜豆的________。除了通过上述方法可以获取铁结合蛋白基因外，还可以通过化学合成的方法获取铁结合蛋白基因，其前提条件是________。(2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制性核酸内切酶分别切割________，该酶作用的部位为________(填化学键名)。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。完整的重组Ti质粒除图示结构外，还应包括________等。(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得________，该筛选过程是通过在培养基2中加入________实现的。培养基3与培养基2的区别是________。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻________。2．(2022·江苏如皋期中考试)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。请回答：(1)天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的载体，经改造后的质粒同时具备的条件有________(填序号)。①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④启动子 ⑤起始密码子(2)若对图1中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性将会______________________________________。(3)用图2中的人乳铁蛋白目的基因和图1所示的质粒构建重组质粒时，选用的限制酶是________(从“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/HindⅢ”、“SmaⅠ/HindⅢ”中选择)。不能选择其他限制酶的理由分别是________________________________________________________________________。(4)图3中，①常用的导入方法是________，为了获得雌性转基因牛，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________，③过程选用的早期胚胎应发育到________阶段。31\n3．(2022·黑龙江哈三中第一次模拟)科学家以番茄(2N)和马铃薯(4N)为材料利用下图技术得到“番茄—马铃薯”植株。请回答下列问题：(1)获得a、b所选用的酶为________，c和d的名称依次是________、________。(2)图示技术名称是________；由d培育成植株的过程运用的技术手段是________，其依据的原理是___________________________。(3)过程②称为________，所用的化学诱导剂一般是________，③过程成功的标志是____________________________________。(4)过程④是________，⑤过程增殖的方式为________，诱导f中植株生根过程中培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程________(高/低)；最终获得的“番茄—马铃薯”属于________倍体植株。4．(2022·河南郑州、长葛第三次质量预测)科学家从某无限增殖的细胞中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答下列问题。(1)利用________技术制备单克隆抗体，常用聚乙二醇、________、电激等诱导因素诱导细胞融合。再经多次筛选和细胞培养获得足够数量的能分泌所需抗体的________细胞。(2)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，请完成设计方案：①取________细胞的细胞核，移植到去核的能够________的细胞中，构成重组细胞。(假定移植后细胞核中基因的表达状态不受影响)②将重组细胞在________条件下做大规模培养或注射到小鼠________内增殖，以获得大量单克隆抗体。(3)也有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因(prG)来制备单克隆抗体，其思路如下图所示。①酶A是指________，酶B是指________。②图中I表示________，对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是________________________________________________________________________，Ⅲ所指细胞具有的特点是________________________________。考点36 胚胎工程与生态工程两年高考真题演练1．(2022·高考安徽卷，31－Ⅱ)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。(1)由过程①获得的A为________。(2)在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是____________________________。受体应选用________期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生________，31\n这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为_______________________________。2．(2022·重庆卷，8)某课题组为解决本地种奶牛产奶量低的问题，引进了含高产奶基因但对本地适应性差的纯种公牛。(1)拟进行如下杂交：♂A(具高产奶基因的纯种)×♀B(具适宜本地生长基因的纯种)―→C选择B作为母本，原因之一是胚胎能在母体内正常________。若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并未提高，说明高产奶是________性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是________，后代中出现这种母牛的概率是________(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。(2)用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。精子要具有受精能力，需对其进行________处理；卵子的成熟在过程________中完成。在过程④的培养基中含有葡萄糖，其作用是________。为筛选出具有优良性状的母牛，过程⑤前应鉴定胚胎的________。子代母牛的优良性状与过程________的基因重组有关。(3)为了提高已有胚胎的利用率，可采用________技术。3．(2022·山东卷，36)治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：(1)过程①采用的是细胞工程中的________技术，过程②采用的是胚胎工程中的________技术。(2)体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液(基)的________。(3)如果克隆过程中需进行基因改造，在构建基因表达载体(重组载体)时必须使用________和________两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外，还需有________基因，以便选出成功导入基因表达载体的细胞。(4)胚胎干细胞可以来自于囊胚中的________。在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体________(填“A”或“B”)，则不会发生免疫排斥反应。4．(2022·高考重庆卷，T7)为治理某废弃采石场的生态环境，对其进行了公园化建设。31\n(1)对其进行整理和覆土，并选择适生植物进行人工造林，不同恢复时期的植物物种数如图所示。t0→t1，植物残体及凋落物中的有机物被生态系统中的________转化为无机物，使土壤条件得到改善；同时由于人工林土壤中存在________，导致群落中植物物种数增加；t1→t3，人工林抵抗力稳定性的变化是___________________________；群落中植物物种数逐渐增加，物种之间________加剧。(2)通过人工林建设的园林景观构建，既改善了生态环境，又可提高社会和经济效益，这主要体现了生态工程的________原理。31\n考点36 胚胎工程与生态工程一年模拟试题精练1．(2022·东北三校第一次联合模拟)在治疗人类某些疾病时，人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织器官后，可用于组织器官的移植，操作流程如图所示。请回答：(1)进行图中过程①时，需将体内取出的卵母细胞在体外培养至______期，该期卵母细胞核的位置靠近________，可用微型吸管将之与细胞核一并吸出。(2)图中过程②表示将用物理或化学方法激活重组细胞，使其在发育培养液中完成________，最终形成囊胚的过程。(3)图中过程③④表示从囊胚中取出________细胞，将其培养在________细胞上，形成大量胚胎干细胞的过程。胚胎干细胞在形态上的特性表现为________。(4)图中过程⑤表示在培养液中加入________，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，用于患者的组织器官移植。2．(2022·湖北八市3月联考)科学家采用不同方法培育良种牛的过程。请据图回答有关问题：(1)与一般的繁育良种动物方式相比较，胚胎移植的优势是________________________________________________________________________。为提高良种奶牛的繁殖能力，在获取卵母细胞之前需用促性腺激素对奶牛进行处理，目的是____________________________。(2)“转基因牛”D培育过程中，常用受精卵作为外源基因的受体细胞，主要原因是_____________________________________。(3)图中数字标号①代表的结构为________，①将来发育为________，c→d过程需对其均等分割的目的是________________________________________________________________________。A、B牛基因型是否相同？________。(4)在培育良种牛的过程中，都运用了动物细胞培养技术，在动物细胞培养过程中，为防止杂菌的污染而要加入一定量的________。3．(2022·江西九江七市第一次联考)在畜牧生产中，人们利用多种方法促进优良畜群的繁育，取得了显著成效。请就高产奶牛的快速繁育过程回答以下问题：(1)克隆奶牛：从供体高产奶牛体内获得体细胞后，31\n对其进行的初次培养称为________________，培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为________________，一般选取传代________代以内的细胞(细胞核)注入体外培养到________期的去核卵母细胞内，通过________________使两细胞融合，构建重组胚胎，在体外培养并移入代孕母牛体内，从而获得与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛。(2)试管牛：将体外培养成熟的卵母细胞与经________________法获能的精子在体外受精后，移入________________中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。通常将胚胎培养至________期，取________细胞做DNA分析性别鉴定，并将雌性胚胎移入________________的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体。4．(2022·北京朝阳区模拟)下图是一个人工农业生态系统模式图(大棚温度、CO2浓度等可适当控制)。请据图回答下面的问题。(1)图中该生态系统能量流动的源头是______________。沼气池中的微生物在该生态系统的成分中属于________。沼气燃烧后生成的CO2通入大棚内的作用是________________________________________________________________________________________________________，从而可提高农作物的产量。(2)相对一般农业生态系统而言，此生态系统能提高经济效益，主要原因是充分利用了________中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的________原理。(3)植物秸秆除作为禽畜的饲料外，还可以经过微生物产生的________酶水解，最终生成葡萄糖，进而转化成乙醇作为燃料。葡萄糖转化成乙醇的反应式为______________________________________。在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，主要体现了生态工程的________原理。31\n选修1 生物技术实践考点33 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用【两年高考真题演练】1．解析 (1)生物组织中的油脂能被苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染成橘黄色(或红色)。(2)为了筛选出能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，我们应选用只能让该菌落生长的选择性培养基，因此培养基中只能选用油脂作为唯一碳源的固体培养基。(3)血细胞计数板可用于直接计数培养液中的菌体数，但是不分死活，因此要计数活菌数量要通过稀释涂布平板法来计数。(4)温度影响酶的活性，在三个温度中，45℃需酶量最高，说明酶活性最低；在三个温度实验中40℃所需酶量最少，低于35℃和45℃所用酶量，说明酶的最适温度介于35℃和45℃之间，因此应围绕40℃开展下面系列实验探究酶需要的最适温度。答案 (1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂 (3)血细胞计数板 稀释涂布平板 (4)45 402．解析 (1)用水密封是为了隔绝空气，因为乳酸菌是厌氧型生物；乳酸菌无氧呼吸第一阶段产生丙酮酸和[H]。(2)8天后亚硝酸盐含量更低，有利于人们的健康，而且泡菜的口感更好，pH值呈下降趋势，是因为乳酸菌无氧呼吸积累了大量乳酸。(3)最适合条件是4%食盐浓度条件。结论：1.普通乳酸菌和优选乳酸菌都是在4%食盐浓度条件下发酵效果最好。2.在相同条件下，使用优选乳酸菌比普通乳酸菌能够提前降低亚硝酸盐含量。答案 (1)隔绝空气，制造无氧环境 丙酮酸和[H](2)亚硝酸盐含量较低，对人体无害 乳酸菌发酵过程中积累了大量乳酸(3)实验结果记录表31\n最适合条件是4%食盐浓度条件结论：1.普通乳酸菌和优选乳酸菌都是在4%食盐浓度条件下发酵效果最好。2．在相同条件下，使用优选乳酸菌比普通乳酸菌能够提前降低亚硝酸盐含量。3．解析 本题考查了土壤中能分解纤维素的微生物及其应用价值，意在考查识记和理解能力，难度较小。(1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图：(2)刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(3)生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌才会发挥作用。纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基。纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基，要分离和鉴别纤维素分解菌，需要以纤维素为主要碳源的培养基，培养基乙不具有选择的作用。答案 (1)纤维二糖 葡萄糖(2)红 透明圈(3)不能 纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基，纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基 不能 培养基中没有纤维素粉4．解析 本题考查了测定某种微生物的数量、微生物的分离和培养等知识，意在考查理解能力。难度较小。(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成；利用平板菌落计数法的计算公式估算水样中的活菌数：×M(×稀释倍数)＝×100＝3.8×107/L(2)接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是：通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落。(3)由题图可知B图为稀释涂布平板法接种的结果(菌落相对均匀分布)。31\n(4)震荡培养可以增加液体培养基的氧气含量，促进好氧型微生物的生长；另外震荡培养还可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。答案 (1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107(2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧 营养物质【一年模拟试题精练】1．解析 (1)①②③⑧⑨应采用消毒，④⑤⑥⑦⑩应采用灭菌，故选A。(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，培养基接种前要进行高压蒸汽灭菌，再进行倒平板。(3)微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，本题是采用平板划线法接种，需要注意的是连续划线时，每次划线前要灼烧接种环，同时划线结束首尾不能相连。(4)检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间，观察培养基上是否有菌落产生。(5)植物组织培养的MS培养基中需要加入植物激素(生长素和细胞分裂素)。(6)制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素结果发酵失败，原因可能是青霉素杀死了乳酸菌。答案 (1)A(2)调整pH 高压蒸汽灭菌(3)防止外来杂菌的入侵 平板划线 灼烧接种环 不连接(不重叠)(4)将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间(5)植物激素(或生长素和细胞分裂素)(6)青霉素杀死了乳酸菌2．解析 (1)欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其他碳源，不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，这类培养基属于选择培养基。(2)分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种。(3)降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。(4)实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)、高压蒸汽灭菌(如培养基)等。无菌操作要求在整个实验过程中操作都在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染。答案 (1)原油 选择 (2)平板划线法 稀释涂布平板法 (3)强(4)灼烧灭菌法 高压蒸汽灭菌法 避免周围环境中微生物的污染3．Ⅰ.(1)毛霉 (2)小分子肽 (3)保证产品质量 (4)抑制微生物的生长 (5)抑制微生物的生长Ⅱ.(1)亚硝酸盐含量低 (2)4∶1 乳酸酸 (3)霉菌 (4)比色法4．解析 (1)在过程①果酒的制作中使用的微生物酵母菌的繁殖方式是出芽生殖，在过程①果酒的制作中主要发生的反应C6H12O6―→2C2H5OH(酒精)＋2CO2＋能量。(2)果酒和果醋的制作中，果酒需要在无氧条件下进行发酵，所以①果酒的制作过程中要间隔放气，其原因是在发酵过程中产生CO2，防止瓶内气压过高引起爆裂，②果醋的制作中由于醋酸菌是需氧型的，所以需要不断通入气体。(3)过程②果醋的制作中使用的微生物是醋酸杆菌，该微生物的代谢类型是异养需氧型。(4)在整个果酒果醋的制作过程结束后与操作开始前相比较有机物的种类增加，有机物的总量减少。31\n(5)果醋发酵初期，发酵罐是密闭的，不需要通气，但发酵装置中仍有部分氧气，此时酵母菌进行有氧呼吸，产生大量二氧化碳和水，二氧化碳溶于水，pH下降，随着氧气的消耗，到发酵中期，酵母菌进行无氧呼吸产生较少的二氧化碳和酒精，pH稍上升，后期接种醋酸菌并通气，醋酸菌大量繁殖，生成醋酸，pH迅速下降，所以符合曲线②，故选B。答案 (1)出芽生殖 C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋能量(2)①在操作过程中要间隔放气，②需要不断通入气体 (3)醋酸杆菌 异养需氧型 (4)增加 减少 (5)B考点34 酶的应用及生物技术在其他方面的应用【两年高考真题演练】1．解析 该题考查胡萝卜素的相关知识及与其萃取有关的知识，考查学生识记和理解能力，难度较小。(1)胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键，根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类，β－胡萝卜素是其中最主要的组成成分；一分子的β－胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A；由于饮食中缺乏维生素A或因某些消化系统疾病影响维生素A的吸收，致使视网膜杆状细胞没有合成视紫红质的原料而造成夜盲(暂时性夜盲症可由补充维生素A得以痊愈)。(2)提取胡萝卜素时新鲜的岩藻具有大量的水份需要进行干燥，以提高萃取效率。(3)乙酸乙酯属于水不溶性有机溶剂与水不互溶，能够溶解胡萝卜素；乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以不宜选作萃取剂。答案 (1)β－胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性(2)需要 (3)乙酸乙酯 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇属于水溶性有机溶剂，影响萃取效果(其他答案合理也可)2．解析 本题考查了微生物的实验室培养、蛋白质的提取与纯化、酶的固定化等知识，考查识记和理解能力。难度较小。(1)产乳糖酶的微生物L自身可以合成乳糖酶，能催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，供自身利用；不能合成乳糖酶的微生物则无法利用乳糖。据此，可利用乳糖作为培养基的唯一碳源来筛选产乳糖酶的微生物。这样的培养基从功能上看属于选择培养基。培养基中添加琼脂的作用是作为凝固剂，制作固体培养基。(2)接种时要严格做到无菌操作，其中接种环应采用酒精灯灼烧灭菌。(3)电泳时，相同条件下，带电荷相同的蛋白质受到的静电引力相同，分子量越小的蛋白质，移动速度越快。(4)酶的作用是催化生化反应，固定化酶要体现其具体的应用价值，必须要具有较高的酶活性。酶的固定化方法有化学结合法、包埋法、物理吸附法、离子吸附法及交联法等。答案 (1)乳糖 凝固剂 选择培养基(2)灼烧(3)小(4)活性 包埋法 物理吸附法3．解析 本题考查实验设计的方法，如实验变量与实验目的、相互对照的梯度及范围、单一变量等相关知识，考查学生对知识的理解能力和运用能力，难度适中。(1)由题意可知三组实验的果胶酶不同，其他条件相同，最后测定是各组的出汁量，所以实验的单因子变量为不同的果胶酶，因变量为果泥的出汁量，即本实验探究不同的果胶酶对同一种果泥出汁量的影响。(2)由题意可知设置的温度为0℃、5℃、10℃、40℃，而探究酶的最适温度应该设置相等的温度梯度；设置的温度范围太过于狭窄，缺少高温组，很可能40℃还没有达到最适温度。(3)由题意可知，A、B、C、D四组中均加入了等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，31\n添加蒸馏水达到相同体积，E组果胶酶的量为0，且直接添加蒸馏水达到相同体积，未加入等量的缓冲液，试验中没有遵循单一变量原则，所以E组的设计不能达到目的。答案 (1)探究不同的果胶酶对同一种果泥出汁量的影响(2)温度梯度设置不均等 温度设置范围太小，缺少高温组(3)不能 E组没有加入等量缓冲液，不符合单一变量原则4．解析 本题考查的是植物组织培养、染色体变异及细胞固定化。难度较小。(1)外植体在人工、无菌条件下，经脱分化可形成愈伤组织。(2)由图可知蔗糖浓度下降，可知外植体离体培养过程中需要消耗蔗糖，12天后蔗糖浓度变化不大说明蔗糖消耗减少；pH下降会影响酶的活性，愈伤组织细胞对物质的合成小于分解，细胞干重下降。植物组织培养过程中，蔗糖既能维持一定的渗透压，又能提供植物细胞生命活动必须的营养物质(能量)。(3)一定浓度的秋水仙素或低温都可抑制纺锤体的形成，使子染色体不能移向两极，从而使细胞中染色体数目加倍。植物细胞间的成分主要是纤维素和果胶，可通过纤维素酶、果胶酶破坏细胞间的物质，从而使愈伤组织细胞分离。在培养过程中，各个细胞所处时期不同，在用秋水仙素或低温处理后，一定时间内不同时期细胞分裂状态不同，从而会出现染色体为2n、4n、8n等的细胞，4n的细胞在有丝分裂后期着丝点分裂，染色体数目加倍至8n；8n的细胞在有丝分裂中期能清晰看出8n条染色体。(4)为了更好地获得次生代谢产物，应选用生长旺盛的愈伤组织。愈伤组织不能进行光合作用，因此要通入无菌空气确保其正常的生命活动。细胞的固定通常使用包埋法，由于包埋材料的影响，营养物质和氧气的扩散都受到一定的限制，所以固定化细胞生长速度慢。答案 (1)脱分化(2)蔗糖浓度下降，pH降低 提供能量 调节渗透压(3)秋水仙素(低温) 果胶 经加倍到4n的细胞处于有丝分裂后期 经加倍到8n的细胞处于有丝分裂中期(4)①③④【一年模拟试题精练】1．解析 (1)图1中的①②为植物组织培养，需要在无菌条件下进行，所以培养基要灭菌。培养基中生长素用量与细胞分裂素用量比值应适中，以促进愈伤组织的生长。(2)接种前，要对胡萝卜切块进行消毒以除去表面的杂菌。若在培养几天后，少数培养基上长出有光泽的黏液状菌落，这属于细菌的菌落。(3)胡萝卜素不溶于水，易溶于有机溶剂，从胡萝卜中提取胡萝卜素时，常用萃取方法，其效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。(4)装置③是冷凝管，其作用是降温，防止加热时有机溶剂挥发。装置④是烧瓶，胡萝卜在加热前，一般要进行粉碎、干燥处理。处理时应注意将温度和干燥时间控制在一定范围内，否则会导致胡萝卜素分解。一般情况下，提取效率与颗粒含水量成反比。(5)装置⑤的加热方式是水浴加热，水浴加热可避免明火加热引起燃烧、爆炸。(6)图2是纸层析结果示意图，图中B胡萝卜素是⑥，与“叶绿体中色素的提取和分离”实验中的层析法不同点是前者是胡萝卜素粗品的鉴定，后者是分离叶绿体中的色素。答案 (1)灭菌 适中(2)消毒 细菌(3)萃取 萃取剂的性质和使用量(4)降温，防止加热时有机溶剂挥发 干燥 将温度和干燥时间控制在一定范围内 反(5)避免使用明火加热引起燃烧、爆炸(6)⑥ 前者是胡萝卜素粗品的鉴定，后者是分离叶绿体中的色素31\n2．解析 (1)从橘皮中提取橘皮精油常用的方法是压榨法，采用压榨法提取橘皮精油的实验流程是：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮精油。(2)由于橘皮精油用水蒸气蒸馏部分有效成分会发生分解，采用水中蒸馏又容易出现焦糊问题，因此橘皮精油的提取一般不采取蒸馏法。(3)橘皮中含有果蜡和果胶，压榨时容易滑脱，为了提高出油率，在压榨前橘皮要在石灰水中浸泡，浸泡时间不低于10小时，并且要浸透。(4)橘皮精油的特点是无色透明、具有诱人的橘香味。(5)采用花药进行植物组织培养时，应选择单核靠边期的花粉；确定花粉发育时期最常用的方法是醋酸洋红法，某些植物的花粉不易着色，需采用焙花青－铬矾法。(6)植物组织培养中的关键激素是细胞分裂素和生长素；由于在柑橘个体发育过程中，不同的细胞中遗传信息执行情况不同，细胞分化形成不同的组织和器官，因此橘树上的细胞不离体经过脱分化过程不能形成完整植株。答案 (1)压榨 压榨 过滤 再次过滤(2)焦糊 水解(3)10h(4)无色透明(5)单核 醋酸洋红 焙花青－铬矾(6)生长素 细胞分裂素(两空顺序可以颠倒) 在柑橘个体发育过程中，不同的细胞中遗传信息执行情况不同，细胞分化形成不同的组织和器官3．解析 (1)要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养，因为生长旺盛的嫩枝生理状况良好，容易进行脱分化。在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药离体培养成功率高。为确定该花粉是否处于该时期，最常用的方法是醋酸洋红法。(2)植物组织培养常用激素为细胞分裂素和生长素。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养某种菌后，pH上升，指示剂变红，可以初步鉴定该细菌能够分解尿素。接种要注意：消毒，无菌，防止杂菌污染，故接种室要消毒；操作时不可说话；外植体接种时要严格消毒，接种完后要防止再次污染，盖好瓶盖，故C正确。(4)月季的花粉植株产生的途径还可以通过胚状体阶段发育而来，与花药离体培养差别主要取决于培养基中激素种类和浓度配比。(5)进行菊花组织培养一般将温度控制在18－22℃，并且对光照的控制为每天12h光照，pH控制在5.8左右。答案 (1)生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化 单核 醋酸洋红法(2)细胞分裂素和生长素(3)酚红 C(4)胚状体 培养基中激素的种类及其浓度配比(5)18～22 每天12h光照选修3 现代生物科技专题考点35 基因工程与细胞工程【两年高考真题演练】1．解析 (1)HIV是RNA病毒，其核酸是单链RNA，而在基因工程中构建目的基因表达载体时，载体一般用的是质粒，为双链DNA，故先用逆转录酶催化HIV的RNA逆转录为DNA分子再进行基因工程操作。(2)本题涉及到了免疫学方面知识，抗原进入机体后可以产生特异性免疫反应，产生相应的抗体，抗体与抗原特异性结合。(3)HIV病毒主要破坏人体T细胞。(4)免疫系统除了具有防卫功能外，31\n还有监控和清除功能：监控并清除体内已经衰老或因其他因素而被破坏的细胞，以及癌变的细胞。答案 (1)RNA 逆转录酶 cDNA(或DNA)(2)抗体 抗原抗体特异性结合 (3)T(或T淋巴) (4)监控和清除2．解析 本题考查蛋白质工程相关知识，考查学生识记和分析、理解能力。难度较小。对蛋白质的氨基酸序列(或结构)进行改造，可达到改变蛋白质的功能的目的。(2)以P基因序列为基础，获得P1基因，可以对P基因进行修饰改造，也可以用人工方法合成P1基因；中心法则的全部内容包括，即：DNA、RNA的复制、DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质(或转录、逆转录、翻译)。(3)蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列，推测相应的核苷酸序列，并获取基因。经表达的蛋白质，要对其进行生物功能鉴定。答案 (1)氨基酸序列(或结构)(其他答案合理也可)(2)P P1 DNA和RNA(或遗传物质) DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白质(或转录、逆转录、翻译)(3)设计蛋白质的结构 推测氨基酸序列 功能3．解析 本题考查基因工程和动物细胞工程相关知识，考查理解能力、获取信息能力和综合运用能力。难度适中。(1)动物细胞间的物质主要成分是蛋白质，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，目的是使组织中的细胞分散成单个细胞。(2)据图1可知，GDNF基因两端和载体上都有XhoI限制酶的酶切位点。(3)据图1可知，用HpaI和BamHI限制酶对三种载体进行酶切，单个载体自连只有HpaI限制酶的酶切位点，得到6000bpDNA的片段；正向连接重组载体有HpaI和BamHI限制酶的酶切位点，得到700bpDNA的片段和6000bpDNA的片段；反向连接重组载体有HpaI和BamHI限制酶的酶切位点，得到200bpDNA的片段和6500bpDNA的片段。(4)检测目的基因是否成功表达，可采用抗原－抗体杂交法。培养的原代细胞贴满瓶壁重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这样的培养过程通常称为传代培养。传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去，科研上使用的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。答案 (1)使细胞分散开 (2)XhoI (3)② (4)抗体 传代4．解析 本题考查基因工程、细胞器的功能、基因表达等相关知识，考查识记能力、理解能力、应用能力。难度中等。(1)从图中四种限制酶的识别的核苷酸序列及切割位点可以看出，限制酶①和限制酶②作用后产生的黏性末端大部分片段相同的，限制酶③和限制酶④作用后产生的黏性末端部分片段相同，为防止酶切位点自身连接，所以在选择时应该选择作用后产生的黏性末端不同的限制酶，所以可以选择的限制酶组合为B(或C)或C(或B)。(2)根据示意图可以看出，菌株Ⅰ与其他菌株细胞的不同在于菌株Ⅰ中无纤维素酶基因，分析转化的DNA不同可知设置菌株Ⅰ为对照的目的是为了验证质粒和酵母菌基因组中不含有纤维素酶基因。(3)基因的表达包括转录和翻译，通过转录合成mRNA，通过翻译合成具有一定氨基酸序列的多肽。从示意图可以看出，菌株Ⅱ和菌株Ⅲ、菌株Ⅳ相比，菌株Ⅲ、菌株Ⅳ合成的纤维素酶分泌到细胞外，所以菌株Ⅲ、菌株Ⅳ中除了核糖体参与合成外，还有内质网和高尔基体参与加工和分泌。(4)纤维素是大分子物质，不能进入细胞内。由于菌株Ⅱ中缺少信号肽编码序列，合成的纤维素酶不能分泌到细胞外，细胞无法利用细胞外的纤维素，所以菌株Ⅱ不能存活，而菌株Ⅲ、菌株Ⅳ可以存活。(5)酵母菌进行无氧呼吸过程中产生酒精，无氧呼吸的场所为细胞质基质。从示意图可以看出，菌株Ⅳ的纤维素酶都固定于细胞壁上，31\n减少了因培养液的更新造成酶的流失，提高了酶的利用率。对比菌株Ⅱ和菌株Ⅲ、菌株Ⅳ导入的重组质粒可以看出，菌株Ⅳ具有这一特点的原因是导入的重组质粒中含有A基因片段。答案 (1)B(或C) C(或B)(2)质粒DNA和酵母菌基因组(3)转录 翻译 内质网、高尔基体(4)Ⅱ 缺少信号肽编码序列，合成的纤维素酶不能分泌到细胞外，细胞无可利用的碳源(5)细胞质基质 无氧呼吸 A基因片段5．解析 本题考查了基因工程和植物组织培养的相关知识，考查识记理解能力，应用分析能力，难度较小。(1)构建重组DNA分子的过程需要用同一种限制性核酸内切酶(限制酶)切割目的基因和质粒，以便产生相同的黏性末端。只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基叫做选择培养基，这里只允许含重组质粒的农杆菌生长，应使用选择培养基。(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让重组质粒中的T－DNA片段进入棉花细胞，除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是筛选出含目的基因的受体细胞。(3)生长素可诱导根的形成，细胞分裂素可诱导芽的形成。在没有激素的培养基上的芽也长出了根，可能与芽自身合成生长素并向下运输促进根的形成有关。(4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是直接接种害虫，观察其生存情况。种植转基因抗虫棉能减少农药的使用，以减轻环境污染。答案 (1)限制性核酸内切(限制) 选择(2)T－DNA 筛选出获得T－DNA片段的植物细胞(3)细胞分裂素 芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化(4)投放棉铃虫 农药6．解析 本题综合考查植物体细胞杂交技术及相关细胞器的功能等相关知识，考查识记能力、理解能力、应用能力及实验探究能力。难度较小。(1)根据表中两种藻的特性可知，A藻具有产生DHA、自养特性的优点，B藻具有快速增长的优点，选育的融合藻应该具有两种藻的优点。(2)由于植物细胞具有细胞壁，影响了原生质体的融合，所以在融合前，需用纤维素酶和果胶酶处理，以获得原生质体。(3)从题中信息可以看出，是通过培养过程的观察和测定DHA进行筛选的。在培养过程中，在无机物选择培养基中不能生长的是B藻，淘汰B藻，生长比较慢的是A藻，最后再通过测定DHA含量获得所需的融合藻。(4)①甲组条件是光照下，培养基中含有无机物，该条件下融合藻既可以进行呼吸作用也可以进行光合作用，产生[H]的细胞器有线粒体和叶绿体；而在丙组黑暗条件下，培养基中含有葡萄糖，该条件下融合藻只进行呼吸作用，产生ATP的细胞器只有线粒体。②乙组条件有光照，培养基中又含有有机物－葡萄糖，融合藻既能光能自养又能异养，所以融合藻生长速度较快；与乙组相比甲组中不需要添加葡萄糖可降低成本，同时甲组的培养基中不含有机物，杂菌无法生长，所以在实际生产中往往采用甲组的培养条件。答案 (1)产生DHA、自养特性 快速增长(2)原生质体(3)b a c(4)①线粒体、叶绿体 线粒体 ②融合藻既能光能自养又能异养 融合藻利用光能和简单的无机物能较快生长，不需要添加葡萄糖，既可降低成本，也可防止杂菌生长7．解析 本题考查单克隆抗体制备的相关知识，意在考查学生的识图和判断能力，难度适中。(1)据图分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上，小鼠Y的B淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，含有骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的自身融合产物，31\n由于细胞膜具有流动性，且诱导之后的细胞不具有特异性，故体系中会出现多种类型的细胞。(3)杂交瘤细胞形成后，由于核膜具有流动性，故小鼠的免疫B淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成一个杂交的细胞核。正常情况下细胞核中的染色体数目为100条，在有丝分裂后期染色体数目临时加倍为200条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能恶性增殖的细胞，同时B淋巴细胞不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机达到细胞系水平。答案 (1)四 Y Y小鼠的B淋巴细胞产生抗体数量较多(2)骨髓瘤细胞自身融合产物、B淋巴细胞自身融合产物 细胞融合不具有特异性，在诱导剂的作用下，相同种类和不同种类的细胞均可以融合(3)1 200(4)①B淋巴细胞高度分化，不能恶性增殖；②不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机【一年模拟试题精练】1．解析 (1)基因文库是指将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入到受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。基因文库包括基因组文库和部分基因文库。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，如cDNA文库。除了通过上述方法可以获取铁结合蛋白基因外，还可以通过化学合成的方法获取铁结合蛋白基因，其前提条件是该基因的脱氧核苷酸序列已知。(2)限制酶的作用部位为磷酸二酯键。构建重组质粒的过程中，通常要用同一种限制酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段，使它们产生相同的黏性末端，然后再用DNA连接酶连接成重组质粒。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用CaCl2溶液处理农杆菌，使农杆菌处于感受态，便于重组Ti质粒导入。基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因。(3)质粒上的标记基因为潮霉素抗性基因，因此通过培养基2的筛选培养，可以获得含有重组质粒的愈伤组织。愈伤组织再分化形成植株过程中需要加入生长素和细胞分裂素，生长素比例高时可促进根的分化，细胞分裂素比例高时可促进芽的分化，因此培养基3与培养基2的区别是生长素和细胞分裂素的浓度比例不同。该基因工程的目的基因为铁结合蛋白基因，因此检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻种子中铁含量。答案 (1)cDNA文库或部分基因文库 该基因的脱氧核苷酸序列已知(2)含目的基因的DNA片段和质粒 磷酸二酯键 Ca2＋ 启动子、终止子(3)含有重组质粒(有潮霉素抗性)的愈伤组织 潮霉素 生长素和细胞分裂素的浓度比例 (成熟)种子中铁含量2．解析 (1)天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的载体，经改造后的质粒同时具备的条件有①标记基因、②多个限制酶切割位点、③对受体细胞无害和④启动子，而⑤起始密码子位于mRNA上。(2)碱基之间的配对遵循碱基互补配对原则，即C－G，A－T，且C和G之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键，因此C和G的含量越高，DNA分子热稳定性也越高。SmaⅠ酶切位点中均为C－G碱基对，因此插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒中的C和G的含量就越高，其热稳定性也越高。(3)若选EcoRⅠ会破坏质粒的复制原点；若选SmaⅠ/HindⅢ，则构建的重组质粒没有标记基因或复制原点，所以用图2中的人乳铁蛋白目的基因和图1所示的质粒构建重组质粒时，选用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ。(4)过程①是将目的基因导入动物受精卵，所用方法是显微注射法；为了获得雌性转基因牛，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定；过程③是将早期胚胎移入代孕母体中所用技术为胚胎移植，时期是发育到桑椹胚或囊胚的早期胚胎。答案 (1)①②③④31\n(2)提高(3)BamHⅠ/HindⅢ 若选EcoRⅠ会破坏质粒的复制原点；若选SmaⅠ/HindⅢ，则构建的重组质粒没有标记基因或复制原点(4)显微注射法 性别鉴定 桑椹胚或囊胚3．解析 本题考查了植物细胞工程的相关内容，着重考查理解能力。难度较小。(1)①为去壁过程，该过程需要采用酶解法，即使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体a、b；②是诱导原生质体融合的过程，c是正在融合的原生质体，d是经过③过程再生细胞壁后形成的杂种细胞。(2)图示为植物体细胞杂交技术获得“番茄—马铃薯”植株的过程，由杂种细胞培育成植株运用的技术手段是植物组织培养，其依据的原理是植物细胞全能性。(3)②是诱导原生质体融合的过程，所用的化学诱导剂一般是PEG(聚乙二醇)，③是再生细胞壁，成功的标志是形成新的细胞壁。(4)④脱分化形成愈伤组织的过程，由愈伤组织再分化形成试管苗的过程中细胞增殖的方式是有丝分裂，诱导分化时生长素与细胞分裂素的比值高促进根的分化，获得的“番茄—马铃薯”具有二者的染色体，为异源六倍体植株。答案 (1)纤维素酶和果胶酶 (正在融合的)原生质体 杂种细胞(2)植物体细胞杂交技术 植物组织培养 植物细胞全能性(3)原生质体融合 PEG/聚乙二醇 杂种细胞再生出细胞壁/形成新的细胞壁(4)脱分化 有丝分裂 高 六4．解析 (1)动物细胞融合技术最重要的用途就是制备单克隆抗体，常用聚乙二醇、灭活的病毒、电激等诱导因素诱导细胞融合。再经多次筛选和细胞培养获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(2)①取特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核，移植到去核的骨髓瘤细胞中，因为骨髓瘤细胞的细胞质中有无限增殖调控基因(prG)，构成重组细胞。②将重组细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，以获得大量单克隆抗体。(3)②图中Ⅰ表示目的基因(无限增殖调控基因或prG)，对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是检测目的基因是否导入和是否表达，Ⅲ具有的特点是既能无限增殖，又能产生特定抗体。答案 (1)动物细胞融合 灭活的病毒 杂交瘤(2)①特定抗原刺激的B淋巴 无限增殖 ②体外 腹腔(3)①限制性核酸内切酶 DNA连接酶 ②目的基因(无限增殖调控基因或prG) 检测目的基因是否导入和是否表达 既能无限增殖，又能产生特定抗体考点36 胚胎工程与生态工程【两年高考真题演练】1．解析 本题考查基因工程，细胞工程以及胚胎工程的相关知识。难度适中。(1)根据题意可知，要将人凝血因子IX基因导入绵羊胎儿成纤维细胞，必须构建基因表达载体，所以由过程①获得的A为基因表达载体。(2)在核移植之前，保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞，必须先去掉受体卵母细胞的核。受体应选用减数第二次分裂中(MⅡ中)期卵母细胞。(3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。(4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养。答案 (1)含目的基因的表达载体(2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞 MⅡ(3)免疫排斥反应(4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养2．解析 本题考查杂交育种和胚胎工程的相关知识31\n，考查识图能力，运用所学知识分析问题和解决问题的能力。难度较大。(1)由于胚胎能在母体内正常生长发育，所以选择B作为母本。若子代母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并未提高，说明适宜本地生长是显性性状(设基因为M)，高产奶是隐性性状(设基因为n)。则♂A基因型是mmnn，♀B基因型是MMNN，♀C基因型是MmNn，为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛(M_nn)，可选择♂A和♀C进行杂交，后代出现该种母牛的概率是××＝1/8。(2)精子经过获能处理才具有受精能力，卵子的成熟发生在受精过程中，即过程③。胚胎培养过程的培养基中含有葡萄糖，葡萄糖氧化分解提供能量。具有优良性状的母牛含有高产奶和适应生长的基因，则胚胎移植前应进行鉴定，同时还需鉴定性别。基因重组发生在减数分裂过程中，控制不同性状的基因重新组合，由于供体公牛是纯合子，不会发生基因重组，供体母牛是杂合子，则子代母牛的优良性状与供体母牛产卵过程中的基因重组有关。(3)为提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术，增加胚胎的数量。答案 (1)生长发育或胚胎发育 隐性 ♂A×♀C 1/8(2)获能或增强活力 ③ 供能 性别、高产奶和适应生长的基因 ②(3)胚胎分割3．解析 本题考查了细胞工程、基因工程、胚胎工程的基本知识，考查识记和理解能力。难度较小。(1)由流程图知，个体A提供去核卵母细胞，个体B提供体细胞核，二者通过①得到重组细胞，重组细胞经②得到囊胚，故①是核移植，②是早期胚胎培养。(2)动物细胞培养时，要通入含有5%CO2的空气，CO2的作用是维持培养液的pH。(3)构建基因表达载体时，要用同种限制酶切割目的基因和运载体，再用DNA连接酶连接。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、复制原点、标记基因等，标记基因的作用是便于目的基因的检测和筛选。(4)胚胎干细胞是从早期胚胎或者原始性腺中分离出来的一类细胞，具有发育的全能性。囊胚中的内细胞团细胞为胚胎干细胞。图中获得的组织器官，其细胞的细胞核来自个体B，将所得组织器官移植给个体B，不会发生免疫排斥反应。答案 (1)核移植 早期胚胎培养 (2)pH (3)限制酶 DNA连接酶 标记 (4)内细胞团 B4．解析 本题考查了生态恢复工程的相关内容，意在考查理解能力。难度较小。(1)生态系统的组成成分中分解者的功能是将动植物遗体残骸中的有机物分解成无机物；从废弃采石场开始进行的演替为次生演替，由于保留了植物的种子或其他繁殖体能使群落中植物物种数可迅速增加；t1→t3植物物种数变多，一般来说，生态系统中的组分越多，食物网越复杂，其抵抗力稳定性越强；群落中的植物物种数增加，相互争夺资源(如阳光、水)和空间越激烈，竞争加剧。(2)生态系统改善后，考虑到社会－经济－自然复合生态系统，体现了整体性原理。答案 (1)分解者 种子或繁殖体 增强 竞争(2)整体性(系统论)【一年模拟试题精练】1．解析 本题考查胚胎工程和核移植知识。意在考查考生的理解能力，难度较小。(1)进行核移植时，需将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期。在去核时，将细胞核及其附近的第一极体一并吸出。(2)重组细胞被激活，分裂分化成早期胚胎。(3)囊胚中有内细胞团，需在饲养层细胞上分化。胚胎干细胞具有细胞体积小、细胞核大、核仁明显的特点。(4)⑤为胚胎干细胞分化为多种细胞，因此需在培养液中加入分化诱导因子。答案 (1)MⅡ中 第一极体(或极体)(2)分裂和分化31\n(3)内细胞团 饲养层 细胞体积小，细胞核大，核仁明显(4)分化诱导因子2．解析 本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程相关知识。考查识记和理解能力，难度较小。(1)胚胎移植的优势是能充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。促性腺激素处理奶牛可促使其超数排卵。(2)动物细胞的受精卵全能性易于表达，因此动物基因工程一般把受精卵作为受体细胞。(3)由图可知，①为囊胚的内细胞团，将来发育成胚胎，胚胎分割要保证对内细胞团均等分割，目的是有利于胚胎的恢复和进一步发育，胚胎分割产生的个体基因型相同。(4)在动物细胞培养过程中，为防止杂菌的污染而要加入一定量的抗生素。答案 (1)可充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 超数排卵(2)受精卵的全能性易于表达(3)内细胞团 胎儿的各种组织 有利于胚胎的恢复和进一步发育 相同(4)抗生素3．解析 (1)克隆奶牛：从供体高产奶牛体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为原代培养；培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂，这种现象称为接触抑制；由于10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，减数第二次分裂中期的卵母细胞才具有受精的能力，因此一般选取传代10代以内的细胞(细胞核)注入体外培养到减数第二次分裂中期的去核卵母细胞内，通过电刺激使两细胞融合，构建重组胚胎，在体外培养并移入代孕母牛体内，从而获得与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛。(2)试管牛：将体外培养成熟的卵母细胞与经化学诱导法获能的精子在体外受精后，移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。通常将胚胎培养至囊胚期，取滋养层细胞做DNA分析性别鉴定，并将雌性胚胎移入同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体答案 (1)原代培养 接触抑制 10 MⅡ中 电刺激(2)化学诱导 发育培养液 囊胚 滋养层 同种的、生理状态相同4．解析 (1)图中该生态系统能量流动的源头是太阳能。沼气池中的微生物是该生态系统的分解者。沼气燃烧后生成的CO2通入大棚内，可以增加大棚中二氧化碳浓度，提高植物光合作用的强度，从而可提高农作物的产量。(2)该生态系统充分利用了粪便等废物中的能量，因此相对一般农业生态系统而言，此生态系统能提高经济效益；“无废弃物农业”主要遵循了生态工程的物质循环再生原理。(3)植物秸秆的主要成分是纤维素，因此可被纤维素酶水解。葡萄糖转化成乙醇的反应式为C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋少量能量。在充分利用能量、减少环境污染的同时，通过饲养家禽、家畜，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，主要体现了生态工程的整体性原理。答案 (1)太阳能 分解者 可以增加大棚中二氧化碳浓度，提高植物光合作用的强度(2)粪便等废物 物质循环再生(3)纤维素 C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋少量能量 整体性31
